- ￥660
- Solarbio
- 北京
- BC4070
- 2025年07月11日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Tannase Activity Assay Kit
- 库存：
现货
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC4070-50T/24S
- 规格：
50管/24样
单宁酶活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4070
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体75 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂一：临用前取1支加入1.5 mL无水乙醇混匀溶解，用不完的试剂可以2-8℃保存一周；
- 标准品：5 mg没食子酸丙酯。临用前加入1.178 mL无水乙醇充分混匀溶解，配成20 μmol/mL的标准溶液，2-8℃保存两周。
单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20)，存在于富含单宁的植物，也广泛存在于微生物中，可以水解酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡萄糖。
使用没食子酸丙酯（PG）作为单宁酶酶促反应的底物，其在270nn下有特征吸收峰，根据其反应前后吸光度的变化来计算单宁酶活力。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、超声破碎仪、研钵/匀浆器、乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液，冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、细胞或细菌样本的制备：先收集细胞或细菌样本到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）。10000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
- 紫外分光光度计预热30min，波长调至270nm，蒸馏水调零。
- 标准液的稀释：取10μL 20μmol/mL的标准溶液，加入3990μL提取液，充分混匀，配制成0.05μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要1000μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
- 对照管样本处理：吸取0.1mL样本于1.5mLEP管中作为对照管，沸水浴5min，冷却至常温待测。
- 加样表（在1.5mLEP管中分别加入）
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 提取液 | 850 | 850 |
| 试剂一 | 50 | 50 |
| 样本 | 100 | 100（已灭活） |
| 混匀，置于40℃水浴锅中准确反应10min，立即沸水浴5min，冰浴冷却至常温。10000rpm，室温离心10min，取上清液待测。 | ||
| 上清液 | 50 | 50 |
| 提取液 | 950 | 950 |
| 充分混匀后测定270nm下的吸光度，分别记为A测定、A对照，计算ΔA测定=A对照-A测定。另取1000μL标准液于石英比色皿中，测定270nm处的吸光度，记为A标准。每个测定管需设一个对照管。标准管只需测1-2次。 | ||
注意事项：
如果A测定大于1.5，可以适当加大稀释倍数，保证总体积1mL不变，如20μL上清液和980μL提取液（相当于F=1000/20=50），计算公式中需改变F和V上清液的数值。
实验实例：
- 取0.1g玉兰叶加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=A对照-A测定=1.126-1.033=0.093，按样本质量计算酶活得：单宁酶（U/g质量）=1000×ΔA÷A标准÷W=1000×0.093÷0.609÷0.1=1527.09 U/g 质量。
相关系列产品：
BC1360/BC1365 尿酸（UA）含量检测试剂盒
BC1340/BC1345 植物总酚（TP）含量检测试剂盒
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
