土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC4005
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体30 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×2瓶	-20℃保存
试剂三	液体30 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	液体1 mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入2.5 mL蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周；
2. 标准品：5 mmol/L的对硝基 苯酚 溶液。

产品说明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基 苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
当ΔA大于1时，建议将上清液稀释后进行测定；当ΔA小于0.02时，建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
实验实例：

1. 取两管0.03g土样，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.305-0.271=0.034，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.412-0.046=0.366，计算酶活得：S-NAG活力（U/g 土样）=0.432×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.432×0.034÷0.366÷0.03=1.3377U/g土样。
2. 取两管0.03g林土样，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，记为A测定管、A对照管。用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.325-0.278=0.047，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.412-0.046=0.366，计算酶活得：S-NAG活力（U/g 土样）=0.432×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.432×0.047÷0.366÷0.03=1.8492U/g土样。

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