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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
保存在-20℃,6个月。
- 保质期:
保存在-20℃,6个月。
- 英文名:
Mitochondrial Complex IV / Cytochrome C Oxidase Activity Assay Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0940
- 规格:
50T/48S/25T/24S
| 规格: | 50T/48S | 产品价格: | ¥1950.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 25T/24S | 产品价格: | ¥1350.00 |
测定意义:线粒体复合体Ⅳ又称细胞色素C 氧化酶,也是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分,负责催化还原型细胞色素C 的氧化,并最终把电子传递给氧,生成水。
测定原理:还原型细胞色素C 在550nm 有特征光吸收,线粒体复合体Ⅳ催化还原型细胞色素C 生成氧化型细胞色素C,因此550nm 光吸收下降速率能够反映线粒体复合体Ⅳ酶活性。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
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文献和实验消耗速率(OCR)降低后,可进一步定位电子传递链的功能异常。 线粒体呼吸链由复合体 Ⅰ‑Ⅳ 以及 ATP 合酶(复合体 Ⅴ)共同组成,通过检测各复合体的酶活,能够明确具体是哪一个复合体发生功能损伤。 常用检测手段有两种:一是分离纯化线粒体后,采用比色法测定复合体酶活;二是通过免疫捕获技术,分别检测复合体 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ 的活性。 注意要点:若实验已经同时观察到 ATP 水平下降与 OCR 降低,此时补充呼吸链复合体活性检测,相比单纯增加 ROS 相关指标,更有利于把机制研究向上游推进。 图5丨电子
性起调节作用。很多凋亡的关键步骤包括caspase激活物的释放和电离子通道的改变,以及线粒体膜电位差的丢失等都发生于线粒体,因此线粒体 对凋亡的发生或抑制起重要作用。 (一)细胞色素C释放与凋亡复合体的形成 在研究哺乳细胞凋亡的生物化学反应时,发现某些位于线粒体内膜的蛋白可以直接启动细胞凋亡,并导致细胞色素C释放到细胞质或细胞核。被释放的细胞色素C可以和Apaf―1结合,改变其构象,大大增加后者与dATP/ATP的亲和性,并且使细胞色素C―Apaf―1形成多聚体。与此
可逆性ATP酶,能在外能驱动下逆浓差转运H 。线粒体内膜呼吸链中有三个酶复合体具有质子泵功能,能将H 由内腔转运到外腔,它们是:细胞色素c氧化酶、辅酶QH2 - 细胞色素c还原酶、NADH- 辅酶Q还原酶。细菌的的质膜上普遍有质子泵,有的伴有呼吸链组分。嗜盐菌膜上的菌紫质(bacteriorhodopsin)受光照驱动,可将H 运入菌体内浓集。
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