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几丁质酶活性检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥820
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0820
  • 2026年02月26日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Chitinase activity assay kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0820-50T/24S

    • 规格

      50管/24样


    几丁质酶活性检测试剂盒说明书
    可见分光光度法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC0820
    规格:50T/24S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂一 液体15mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 液体12 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂三 液体5mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂四A 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂四B 液体70mL×1瓶 2-8℃保存
    标准品 粉剂×1 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂二:此试剂为悬浊液,使用前需摇匀;
    2. 试剂三:饱和溶液,低温(2-8℃)条件取出会有晶体析出,60℃加热使其溶解即可;
    3. 试剂四:临用前取一瓶试剂四A,加入32mL试剂四B中,充分溶解,现用现配。用不完的试剂2-8℃可以保存4周(试剂四B若有结晶可37℃促进溶解);
    4. 标准品:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。临用前加入 1mL 试剂一配制成 5mg/mL 的标准溶液,即5000μg/mL的标准溶液,2-8℃可以保存4 周。
    产品说明:
    几丁质酶主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
    几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲*甲醛反应产生显色物质,该显色物质在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪冰和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件

    注意事项:
    1. 反应结束后尽快进行比色。
    2. 吸光值大于1.5或者ΔA大于1时,样本用提取液适当稀释再测定或者缩短37℃酶促反应时间,注意计算公式修改;若ΔA小于0.01时,可以延长第一步37℃反应时间或者加大样本的加入量,注意修改计算公式。
    实验实例:
    1. 取0.111g虾壳加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A测定-A对照=0.767-0.008=0.759,带入标曲y=0.0087x+0.0021,得出x=87.0μg/mL,按样本质量计算酶活得:
    几丁质酶活性(U/g 质量)=2.5×x÷W =1959.5 U/g 质量。
    1. 取0.113g平菇加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A测定-A对照=0.918-0.01=0.908,带入标曲y=0.0087x+0.0021,得出x=104.126μg/mL,按样本质量计算酶活得:
    几丁质酶活性(U/g 质量)=2.5×x÷W =2303.7 U/g 质量。
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    图标文献和实验
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    AuthorCongcong Wang, Yinhua Chen, Songbi Chen, Yi Min, Yanqiong Tang, Xiang Ma, Hong Li, Juanjuan Li, Zhu LiuPublish_toCARBOHYDRATE POLYMERS
    IF11.2000PMID37479443
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