- ￥420
- Solarbio
- 北京
- BC1050
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NADP-Malate Dehydrogenase（NAD-MDH）Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1050-50T/48S
- 规格：
50管/48样
脱氢酶（NADP-MDH）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC1050
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
- 试剂二：临用前加入250 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；
- 试剂三：临用前加入300 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 样本的提取必须在0℃-4℃中操做完成，以防止酶变性失活。
- 实验时，试剂二、试剂三和样本在冰上放置，以免变性和失活。试剂一37℃放置。
- 建议一人加样一人比色。尽量保持反应温度为37℃。
- 取0.1g大鼠心脏组织加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.694-0.628=0.066，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.652-0.643=0.009，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.057，按样本鲜重计算酶活得：
参考文献：
- Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.
BC0310/BC0315 辅酶Ⅰ NAD（H）含量检测试剂盒
BC1030/BC1035 NAD激酶（NADK）活性检测试剂盒
BC0630/BC0635 NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorZhuo Li, Boguang Yang, Zhengmeng Yang, Xian Xie, Zhengnan Guo, Jianyang Zhao, Ruinan Wang, Hao Fu, Pengchao Zhao, Xin Zhao, Guosong Chen, Gang Li, Fuxin Wei, Liming Bian | Publish_toADVANCED MATERIALS |
| IF29.4000 | PMID38295393 |
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
【 实验目的 】 学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法 【 实验原理 】 核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光，RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处。一般在260nm波长下，每1ml含1µg RNA溶液的光吸收值为0.022~0.024，每1m1含1µg DNA溶液的光吸收值约为0.020，故测定未知浓度RNA或DNA
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