- ￥800
- Solarbio
- 北京
- BC1055
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NADP-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1055-100T/96S
- 规格：
100管/96样
果酸脱氢酶（NADP-MDH）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1055
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
- 试剂二：临用前加入500 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；
- 试剂三：临用前加入600 μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
MDH（EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH， NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/ 96孔板（UV板）、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 样本的提取必须在0℃-4℃中操做完成，以防止酶变性失活。
- 实验时，试剂二、试剂三和样本在冰上放置，以免变性和失活。试剂一37℃放置。
- 建议一人加样一人比色。因时间监测范围小，不推荐用96孔UV板同时测多个样本。
- 用分光光度计时，当初始值小于0.7或者ΔA大于0.5时，建议稀释后测量。
- 取0.1g心脏组织加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.7173-0.6399=0.0774，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.6583-0.6562=0.0021，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0753，按样本质量计算酶活得：
- 取5μL血清直接按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定= 0.6934-0.6854=0.008，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.6583-0.6562=0.0021，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0059，按血清/血浆体积计算酶活得：
参考文献：
- Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.
BC0310/BC0315 辅酶Ⅰ NAD（H）含量检测试剂盒
BC1030/BC1035 NAD激酶（NADK）活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorZhuo Li, Boguang Yang, Zhengmeng Yang, Xian Xie, Zhengnan Guo, Jianyang Zhao, Ruinan Wang, Hao Fu, Pengchao Zhao, Xin Zhao, Guosong Chen, Gang Li, Fuxin Wei, Liming Bian | Publish_toADVANCED MATERIALS |
| IF29.4000 | PMID38295393 |
为催化苹果酸脱羧反应的酶。正式名称称为苹果酸脱氢酶（脱羧作用）。已知有三种苹果酸酶（ EC1． 1． 1． 38— 40）。其中以 NADP为受体的酶（ EC1． 1． 1． 40）催化生成下列反应： Δ G°′ =-0.36千卡。丙酮酸羧化反应（是 H． G． Wood和 C． H． Werkman， 1938最初发现的反应）中有的是苹果酸酶的作用，有的是丙酮酸羧化酶的作用，在生物体内已知以后者的作用为主。两者都是供给三羧酸循环中间体的补充反应
物；(3)这个三元复合物与HCO-3作用产生羧基磷酸与PEPC·Mg2+ 和烯醇式丙酮酸复合物，前者释放出CO2与Pi；(4)CO2与PEPC·Mg2+·烯醇作用产生OAA与PEPC·Mg2+ ，OAA为羧化反应的产物，PEPC·Mg2+ 则再次进行反应。PEPC是胞质酶，主要分布在叶肉细胞的细胞质中，分子量400 000，由四个相同亚基组成。PEPC无加氧酶活性，因而羧化反应不被氧抑制。 2.还原或转氨阶段 OAA被还原成苹果酸或经转氨作用形成天冬氨酸。 (1)还原反应 由NADP-苹果酸脱氢酶
高等动物（牛、羊、狗、猫等）的肝脏及弱氧化醋杆菌（ Acetobacter subaxydans等）中存在的一种酶。催化 D-葡萄糖 NAD（ P） D-葡糖酸（的内酯） NAD（ P） H的反应。来源于动物的酶（ EC． 1． 1． 1． 47）既能利用 NAD，也能利用 NADP。虽然对 D-木糖也显有 25％的活性，但对其他天然己糖和戊糖则几乎没有作用（动物）。醋酸杆菌属（ Acetobacter）的酶（ EC1． 1． 1． 119）对 NADP具有是特异的作用，但也能作用
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