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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Micro Soluble Starch Synthase(SSS)Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC1855-100T/96S
- 规格:
100管/96样
可溶性淀粉合成酶(SSS)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1855
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体16 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二A | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二B | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂二C | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂三A | 液体12mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三B | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体27μL×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂五A | 液体18mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五B | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五C | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 粉剂×3支 | -20℃保存 |
| 试剂七 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
- 试剂二:临用前取1瓶试剂二A加入8 mL试剂一,缓慢加热,逐渐升温至煮沸使其溶解,冷却后加入1支试剂二B和1支试剂二C混合溶解,这样可以分两批配制并且测定,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
- 试剂三:临用前取1瓶试剂三B加入5mL试剂三A溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
- 试剂四:临用前先离心,取12.5 μL试剂四加入4 mL溶解好的试剂三混合备用(约53T),现用现配,也可根据样本量按比例配制。
- 试剂五:临用前取1瓶试剂五B加入8mL试剂五A和1支试剂五C溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
- 试剂六:临用前取1支加入208 μL蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
- 试剂七:临用前加入2mL蒸馏水,用不完的试剂-20℃分装保存8周,避免反复冻融。
SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。
SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙 酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
实验实例:
- 取约0.1g肝脏加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g ,4℃离心10分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=0.3809-0.1959=0.185,按样本质量计算酶活得:
- 取约0.1g冬青加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g ,4℃离心10分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=1.3654-1.3601=0.0053,按样本质量计算酶活得:
参考文献:
[1] Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
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文献和实验| AuthorMa Mingyang, Zhu Tong, Cheng Xiuyue, Li Mengyu, Yuan Guoliang, Li Changbao, Zhang Aihong, Lu Congming, Fang Ying, Zhang Yi | Publish_toJOURNAL OF EXPERIMENTAL BOTANY |
| IF6.9000 | PMID |
以腺苷二磷酸葡萄糖( ADPG)为葡萄糖的供体,是对葡糖聚合体,通过糖基( glycosyl)转移而催化α- 1, 4-糖苷键的延长作用的酶。 EC2. 4. 1. 21。此外, ADPG是通过葡糖 -1-磷酸 ATP→ ADPG+ ppi的酶反应(葡糖 -1-磷酸腺苷酰转移酶( EC2. 7. 7. 27)而形成。有与淀粉粒结合的颗粒性和可溶性二种。粳型(直链淀粉 20%,支链淀粉 80%)的玉米和水稻的合成酶是颗粒性的,在糯型种子(支链淀粉 100%)中,几乎全部活性
前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今,已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签,目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性,使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合
(一)检测原理 血细胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。 1、离心法:包括温氏法(Wintrobe法)、微量法:是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。 2、血液分析仪法:原理是当细胞通过计数小孔时,形成相应大小的脉冲,脉冲的多少即为细胞数量,脉冲高度为细胞体积,通过红细胞平均体积(MCV)和红细胞计数(RBC)即求得血细胞比容,Hct=MCV×RBC











