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可溶性淀粉合成酶(SSS)试剂盒 微量法

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  • ¥5650
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC1855
  • 2025年07月09日
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    • 详细信息
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    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Micro Soluble Starch Synthase(SSS)Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC1855-100T/96S

    • 规格

      100管/96样


    可溶性淀粉合成酶(SSS)活性检测试剂盒说明书
    微量法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC1855
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体110 mL×1 2-8℃保存
    试剂一 液体16 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二A 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂二B 粉剂×2 -20保存
    试剂二C 粉剂×2 -20保存
    试剂三A 液体12mL×1 2-8℃保存
    试剂三B 粉剂×2 -20℃保存
    试剂 液体27μL×1 2-8℃保存
    试剂A 液体18mL×1 2-8℃保存
    试剂B 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂C 粉剂×2 2-8℃保存
    试剂 粉剂×3 -20℃保存
    试剂 粉剂×1 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂二:临用前1试剂二A加入8 mL试剂一,缓慢加热,逐渐升温至煮沸使其溶解,冷却后加入1试剂B1试剂C混合溶解这样可以分两批配制并且测定用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
    2. 试剂三:临用前1试剂B加入5mL试剂A溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
    3. 试剂四:临用前先离心,取12.5 μL试剂四加入4 mL溶解好的试剂三混合备用(约53T),现用现配,也可根据样本量按比例配制。
    4. 试剂五:临用前1试剂B加入8mL试剂A1试剂C溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融。
    5. 试剂六:临用前1加入208 μL蒸馏水充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融。
    6. 试剂七:临用前加入2mL蒸馏水,用不完的试剂-20℃分装保存8周,避免反复冻融
    产品说明:
    SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。
    SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙 酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件

    实验实例:
    1. 取约0.1g肝脏加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g 4℃离心10分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=0.3809-0.1959=0.185,按样本质量计算酶活得:
    SSS活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W=79.92 U/g 质量。
    1. 取约0.1g冬青加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g 4℃离心10分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA=A2-A1=1.3654-1.3601=0.0053,按样本质量计算酶活得:
    SSS活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W =2.2896 U/g 质量。
    参考文献:
    [1] Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
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    图标文献和实验
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    IF6.9000PMID
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