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β-淀粉酶测试盒 微量法

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  • ¥1080
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC2045
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Micro β-amylase Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC2045-100T/48S

    • 规格

      1100

    β-淀粉酶(
    β-AL)活性检测试剂盒说明书(DNS显色法)

    微量法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC2045
    规格:100T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    试剂一 液体35 mL×1瓶 常温保存
    试剂二 液体10 mL×2瓶 2-8℃保存
    试剂三 粉剂×2 2-8℃保存
    标准品 粉剂×1 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂一:若有黄色晶体析出,需加热溶解后再用;
    2. 试剂二:临用前取取1支试剂三加入到1瓶试剂二中,置于常温水中并加热至煮沸,期间不断搅拌粉剂至溶解,用不完的试剂2-8保存4
    3. 标准品:10 mg无水葡萄糖。临用前加入1 mL蒸馏水配制成10 mg/mL的标准溶液2-8保存两周
    产品说明:
    淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2) 从淀粉的非还原端切开α-1,4糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。
    还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
    称取约0.1g样本,加入0.8mL蒸馏水,研磨匀浆;将匀浆倒入离心管中,提取液在室温下放置提取15min,每5min振荡1次,使其充分提取;6000g,常温离心10min,取上清液加蒸馏水定容至10mL,摇匀,即淀粉酶原液。
    吸取上述淀粉酶原液1mL,加入4mL蒸馏水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α+β)淀粉酶总活力的测定。
    二、测定步骤
    1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到540nm,分光光度计蒸馏水调零。
     
    1. 标准液的稀释:将10mg/mL葡萄糖标准液用蒸馏水稀释为0.50.250.1250.06250.031250.0156250.0078 mg/mL的标准溶液。
    2. 标准液稀释可参考下表:
    序号 稀释前浓度(mg/mL) 标准液体积(µL) 蒸馏水体积(µL) 稀释后浓度(mg/mL)
    1 10 50 950 0.5
    2 0.5 200 200 0.25
    3 0.25 200 200 0.125
    4 0.125 200 200 0.0625
    5 0.0625 200 200 0.03125
    6 0.03125 200 200 0.015625
    7 0.015625 200 200 0.0078
    备注:实验中每个标准管需75µL标准溶液。
    1. 取2支EP管分别加入75μL淀粉酶原液和淀粉酶稀释液,沸水浴5min,分别作为α-淀粉酶对照管和淀粉酶对照管使用。
    2. 测定操作表:
    试剂名称(μL α淀粉酶活力测定 总淀粉酶活力测定 标准曲线测定
    对照管 测定管 对照管 测定管 标准管 空白管
    淀粉酶原液 75(煮沸) 75 - - - -
    蒸馏水 - - - - - 75
    标准溶液 - - - - 75 -
    置于70℃水浴锅中准确反应15min,冷却至室温
    淀粉酶稀释液 - - 75(煮沸) 75 - -
    试剂二 - 75 - 75 - -
    于40℃水浴中准确保温5min
    试剂一 150 150 150 150 150 150
    试剂二 75 - 75 - 75 75
    混匀,沸水浴10min,取200μL96孔板或微量玻璃比色皿中,在540nm下测定吸光度,从左到右分别记为A1A2A3A4A5A6,计算ΔAα=A2-A1ΔA=A4-A3ΔA标准=A5-A6每个测定管需设一个对照管。标准曲线和空白管只需测1-2次

    注意事项:
    测定的吸光值大于1.5时,可以对样本进行适当稀释后测定。若吸光值过小,可以浓缩淀粉酶稀释液或者淀粉酶原液。
    参考文献:
    [1] Dziedzoave N T, Graffham A J, Westby A, et al. Influence of variety and growth environment on β-amylase activity of flour from sweet potato (Ipomea batatas)[J]. Food control, 2010, 21(2): 162-165.
    相关系列产品:
    BC0700/BC0705  淀粉含量检测试剂盒
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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    Gut microbiome as a key monitoring indicator for reintroductions of captive animals点击查看
    AuthorGuangping Huang, Dunwu Qi, Zhisong Yang, Rong Hou, Wenyu Shi, Fangqing Zhao, Zitian Li, Li Yan, Fuwen WeiPublish_toCONSERVATION BIOLOGY
    IF6.3000PMID37650395
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