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抗坏血酸过氧化物酶活性测定试剂盒 微量法

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  • ¥1350
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0225
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Ascorbate Peroxidase(APX) Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0225-100T/96S

    • 规格

      100管/96样


    抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性检测试剂盒说明书
    微量法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC0225
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

    试剂名称规格保存条件
    提取液液体110 mL×12-8℃保存
    粉剂一粉剂×12-8℃保存
    试剂一液体15 mL×1瓶2-8℃保存
    试剂二粉剂×22-8℃保存
    试剂三液体0.25mL×1支2-8℃保存

    溶液的配制:
    提取液:临用前将粉剂一倒入提取液中,溶液为悬浊液,摇匀使用即可,2-8℃可以保存12周。
    试剂二:临用前加10 mL蒸馏水充分溶解。4℃可以保存1周。(由于试剂稳定性较差,故多给一瓶)
    试剂三:使用前先离心。临用前根据样本量取适量试剂三用蒸馏水稀释100倍使用即可。
    产品说明:
        APXEC.1.11.1.11是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX具有多种同功酶,分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体,以及过氧化体和类囊体膜上。APX催化H2O2氧化AsA,是植物AsA的主要消耗者。APX的活性直接影响到AsA的含量,APXAsA具有一定的负相关性。
    APX催化H2O2氧化AsA,通过测定AsA氧化速率,来计算得APX活性。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
        紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96UV板、低温离心机、移液枪、水浴锅、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    实验实例:

    1. 取0.1g小蓟样本加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA空白管=A1空白管-A2空白管=0.5453-0.5287=0.0166,ΔA测定管=A1测定管-A2测定管=0.7097-0.6137=0.096,按样本质量计算酶活:

    APX活性(U/g 质量)=1.79×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷W=1.79×(0.096-0.0166÷0.1=1.421 U/g 质量。
    相关发表文献:

    1. Meng C, Quan T Y, Li Z Y, et al. Transcriptome profiling reveals the genetic basis of alkalinity tolerance in wheat[J]. BMC genomics, 2017, 18(1): 24.
    2. Qin Y, Djabou A S M, An F, et al. Proteomic analysis of injured storage roots in cassava (Manihot esculenta Crantz) under postharvest physiological deterioration[J]. PloS one, 2017, 12(3).
    3. Zhang Z, Liu H, Sun C, et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice[J]. Journal of plant physiology, 2018, 229: 100-110.
    4. Zhao Y, Yu W, Hu X, et al. Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense[J]. Gene, 2018, 660: 109-119.
    5. Djabou A S M, Qin Y, Thaddee B, et al. Effects of Calcium and Magnesium Fertilization on Antioxidant Activities during Cassava Postharvest Physiological Deterioration[J]. Crop Science, 2018, 58(3): 1385-1392.

    参考文献:

    1. Shigeoka S, Nakano Y, Kitaoka S. Metabolism of hydrogen peroxide in Euglena gracilis Z by L-ascorbic acid peroxidase[J]. Biochemical Journal, 1980, 186(1): 377.
    2. Caverzan A, Passaia G, Rosa S B, et al. Plant responses to stresses: role of ascorbate peroxidase in the antioxidant protection[J]. Genetics and molecular biology, 2012, 35(4): 1011-1019.

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    图标文献和实验
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