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- Solarbio
- 北京
- BC0255
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Hydroxyproline(HYP) Content Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0255-100T/96S
- 规格：
100管/96样
羟脯氨酸（HYP）含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC0255
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 自备试剂 | - |
| 试剂一 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体0.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 提取液：自备6 mol/L盐酸溶液，大约需要200mL，常温保存；试剂盒内提供一个30mL棕色空瓶，仅做分装使用，请自行标注试剂名称
- 6 mol/L盐酸提取液的配制：按浓盐酸（37%）和H2O的体积比是1：1进行配制。
- 标准品：0.5 mg/mL羟脯氨酸标准品。
HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
样本经水解产生游离的HYP，进一步被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲*甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样本水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。
技术指标：
最低检出限：0.057 μg/mL
线性范围：0.234-30 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、6mol/L盐酸、*溶液和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者用蒸馏水稀释样本后再进行测定。
- 试剂有一定的毒性，请操作时做好防护措施，防止吸入或与皮肤接触。
- 按样本蛋白浓度计算时，需单独提取样本中的蛋白质并测定。
- 取0.2g小鼠皮肤进行样本处理，取上清后蒸馏水稀释32倍后按测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.375-0.123=0.252，带入标准曲线y=0.0344x+0.015，R2=0.9975，计算x=6.89，按样本质量计算含量得：
- 取8×106个HMC-1细胞进行样本处理，取上清后按测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.183-0.126=0.057，带入标准曲线y=0.0344x+0.015，R2=0.9975，计算x=1.22，按细胞数量计算含量得：
- 取300μL牛血清进行样本处理，取上清后按测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A空白管=0.194-0.123=0.071，带入标准曲线y=0.0344x+0.015，R2=0.9975，计算x=1.63，按液体体积计算含量得：
相关发表文献：
- Zhao P, Sun T, Lyu C, Liang K, Niu Y, Zhang Y, Cao C, Xiang C, Du Y. Scar-Degrading Endothelial Cells as a Treatment for Advanced Liver Fibrosis. Adv Sci (Weinh). 2023 Feb;10(4):e2203315. doi: 10.1002/advs.202203315. Epub 2022 Dec 9. PMID: 36494102; PMCID: PMC9896053.
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- Wu K, Liu Y, Xia J, Liu J, Wang K, Liang H, Xu F, Liu D, Nie D, Tang X, Huang A, Chen C, Tang N. Loss of SLC27A5 Activates Hepatic Stellate Cells and Promotes Liver Fibrosis via Unconjugated Cholic Acid. Adv Sci (Weinh). 2024 Jan;11(2):e2304408. doi: 10.1002/advs.202304408. Epub 2023 Nov 13. PMID: 37957540; PMCID: PMC10787101.
- Xia S, Liu Z, Cai J, Ren H, Li Q, Zhang H, Yue J, Zhou Q, Zhou T, Wang L, Liu X, Zhou X. Liver fibrosis therapy based on biomimetic nanoparticles which deplete activated hepatic stellate cells. J Control Release. 2023 Mar;355:54-67. doi: 10.1016/j.jconrel.2023.01.052. Epub 2023 Feb 2. PMID: 36693527.
- Naeini A, Miri R, Shafiei N. et al. Effects of topical application of Calendula officinalis gel on collagen and hydroxyproline content of skin in rats[J]. Comparative Clinical Pathology, 2012, 21: 253-257.
- Ignat’eva N, Danilov N, Averkiev S. et al. Determination of hydroxyproline in tissues and the evaluation of the collagen content of the tissues[J]. Journal of Analytical Chemistry, 2007, 62: 51-57.
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文献和实验| AuthorHuang Ting, Lin Ruyi, Su Yuanqin, Sun Hao, Zheng Xixi, Zhang Jinsong, Lu Xiaoyan, Zhao Baiqin, Jiang Xinchi, Huang Lingling, Li Ni, Shi Jing, Fan Xiaohui, Xu Donghang, Zhang Tianyuan, Gao Jianqing | Publish_toNature Communications |
| IF16.6000 | PMID37723135 |
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
亚氨基酸之一，通常在第四位上带有羟基，但有时也在第 3位上。由于有两个不对称的碳原子，所以有 4种立体异构体。在动物胶和骨胶原中含有 L-羟脯氨酸。自然界中不存在 D-羟脯酸。 L-别羟脯氨酸是从鬼笔鹅膏（ Amanita Phalloides）中得到的有毒的多肽鬼笔环肽（ phalloidine）的组成成分。一般的蛋白质不存在这种氨基酸。在自然界的羟脯氨酸的甲基衍生物中有左旋水苏碱（ betonicine）、右旋水苏碱（ turicine）〔这些都存在于林生
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