- ￥670
- Solarbio
- 北京
- BC2300
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Alkali Proteinase(AKP) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC2300-50T/24S
- 规格：
50管/24样
碱性蛋白酶（AKP）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC2300
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体35mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体50mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体10mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体1mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂一：临用前加入10mL蒸馏水，充分溶解；
- 试剂二：临用前加入10mL 提取液，沸水浴中搅拌溶解。
- 标准品：20μmol/mL标准酪氨酸。
AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类，属于丝氨酸蛋白酶。此外，该酶还能够水解酯键、酰胺键，具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一，广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。
在碱性条件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，测定680nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
研钵/匀浆器、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP管、冰 和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
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文献和实验| AuthorZhijun Cao, Yuxia Liu, Siliang Chen, Wenxin Wang, Zhongcheng Yang, Ya Chen, Shixuan Jiao, Wanqiu Huang, Lianru Chen, Lidan Sun, Zheng Li, Luyong Zhang | Publish_toBIOCHEMICAL PHARMACOLOGY |
| IF5.8000 | PMID37567318 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
内产物的生成量。由于酶促反应速度可随时间的推移而逐渐降低其增加值，所以，为了正确测得酶活力，就必须测定酶促反应的初速度。 碱性蛋白酶在碱性条件下，可以催化酪蛋白水解生成酪氨酸。酪氨酸为含有酚羟基的氨基酸，可与福林试剂 （磷钨酸与磷钼酸的混合物）发生福林酚反应。（福林酚反应：福林试剂 在碱性条件下极其不稳定，容易定量地被酚类化合物还原，生成钨蓝和钼蓝的混合物，而呈现出不同深浅的蓝色。）利用比色法即可测定酪氨酸的生成量，用碱性蛋白酶在单位时间内水解酪蛋白产生的酪氨酸的量来表示酶活
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
