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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
-20℃
- 英文名:
Monodehydroascorbate Reductase (MDHAR) Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0650-50T/48S
- 规格:
50管/48样
还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC0650
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体30mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体×1瓶 | -20℃保存 |
- 试剂二:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解,2-8℃保存;
- 试剂三:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融;
- 试剂四:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加5 mL试剂一充分溶解,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。
MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsA和NAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
研钵/匀浆器、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
操作步骤:“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项:
当ΔA测定大于0.3时,建议客户稀释样本或者调整试剂一和上清液的比例(如将400μL试剂一+300μL上清液改为600μL试剂一+100μL上清液)后进行测定。
当ΔA测定过小时,建议客户提高样本量或者调整试剂一和上清液的比例(如将400μL试剂一+300μL上清液改为200μL试剂一+500μL上清液)。
当A1大于1.5时,建议将样本稀释进行测定。
空白管为检测各管试剂组份的检测孔,正常情况下,其OD值在0.5左右,变化不超过0.01。
由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以在测定样品蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。
实验实例:
- 取0.1g橙子果肉加入1mL提取液进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.827-0.8=0.027,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.536-0.532=0.004,按样本质量计算酶活得:
相关发表文献:
- Yali Zhou,Sufang Huo,Liting Wang,et al. Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings. Plant Physiology and Biochemistry. September 2018;(IF3.404)
BC1230/BC1235 抗坏血酸(AsA)含量检测试剂盒
BC1240/BC1245 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒
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文献和实验| AuthorSunjeet Kumar, Yang Liu, Mengzhao Wang, Mohammad Nauman Khan, Shihai Wang, Yongping Li, Yanli Chen, Guopeng Zhu | Publish_toCHEMOSPHERE |
| IF8.8000 | PMID38199502 |
网络 二十四、实验动物器官中脱氢酶活性 表12-59 器官中脱氢酶活性 [122] 酶类 动物种类 体重(克) 动物数 测定单位 肝 肾 心 脑 葡萄糖6磷酸脱氢酶 豚鼠 350~400 88 瑞氏单位/克 0.5±0.08 〃 〃 350 6 〃 0.6±0.16 〃 兔 1200
网络 二十五、实验动物血液中氧化还原酶活性 表12-60 血中氧化还原酶活性 [122] 酶类 动物种类 体重(克) 动物数 测定单位 血 血清 过氧化氢酶 大鼠 120 毫克/毫升/分 722±241 〃 〃 13 MIE 33.8±0.4 〃 兔 90 毫克/毫升/分 9028±390
一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算,酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机;紫外分光光度计;研钵;试管。三、试剂50mmol/L K2PO4-KH2PO4缓冲液(PH7.0,内含0.1mmol/L EDTA-Na2)
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