- ￥1700
- Solarbio
- 北京
- BC0535
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Phosphofructokinase(PFK) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0535-100T/96S
- 规格：
100管/96样
磷酸果糖激酶（PFK）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0535
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二A | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂二B | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂二C | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂二D | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体25μL×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体10μL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂二A：临用前加入1mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
- 试剂二B：临用前加入1mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
- 试剂二C：临用前取一支加入0.5mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；
- 试剂二D：临用前加入1mL蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
- 试剂三：临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为1μL:50μL（约5T）的体积比例充分混匀，现用现配；
- 试剂四：临用前根据用量按照试剂四:蒸馏水为1μL:125μL（约12T）的体积比例充分混匀，现用现配；
- 工作液的配制：根据样本量按试剂一：试剂二A：试剂二B：试剂二C：试剂二D =8mL：0.5mL：0.5mL：0.5mL：0.5mL（约55T）的比例配制工作液，现用现配。
磷酸果糖激酶（Phosphofructokinase，PFK，EC 2.7.1.11）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖二磷酸和ADP，是糖酵解过程的关键调节酶之一。
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-二磷酸和ADP，丙 酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PFK活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 测定过程中试剂三、试剂四和样本在冰上放置，以免变性和失活。
- 比色皿中反应液的温度必须保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
- 最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
- 不同匀浆组织中PFK活性不一样，若ΔA>0.5，则说明活性太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液，或缩短反应时间至2min或5min，使ΔA<0.5，以提高检测的灵敏度。注意同步修改计算公式。
- 取0.1g黑麦草加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清之后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA=A1-A2=1.6086-1.2986=0.31，按样本质量计算酶活得：
- 取0.1g桃叶加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清之后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA=A1-A2=1.7025-1.6159=0.0866，按样本质量计算酶活得：
参考文献：
- Papagianni M, Avramidis N. Lactococcus lactis as a cell factory: a twofold increase in phosphofructokinase activity results in a proportional increase in specific rates of glucose uptake and lactate formation[J]. Enzyme and microbial technology, 2011, 49(2): 197-202.
BC2200/BC2205 丙 酮酸（PA）含量检测试剂盒
BC2230/BC2235 乳酸（LA）含量检测试剂盒
BC2190/BC2195 磷酸烯醇式丙 酮酸羧化酶（PEPC）活性检测试剂盒
BC2250/BC2255 3-磷酸甘油酸激酶（PGK）活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorYihan Yu, Lihua Hu, Dandan Tian, Yingying Yu, Lingzheng Lu, Jiongming Zhang, Xianke Huang, Maocang Yan, Liangbiao Chen, Zhichao Wu, Wei Shi, Guangxu Liu | Publish_toENVIRONMENTAL POLLUTION |
| IF9.9880 | PMID37105466 |
6- 磷酸果糖激酶 6－phosphofructokinase
糖酵解开始催化果糖- 6- 磷酸进一步磷酸化而形成果糖 - 1， 6－二磷酸反应的酶 EC2． 7． 1． 11。Δ G°′ = - 3.40千卡。磷酸供体为 ATP。在肌肉、脑及植物等广泛存在。此酶为变构酶，为糖酵解的重要调节点。可被高浓度的 ATP和柠檬酸阻抑，可被 ADP和 AMP活比。分子量很大（约 36万）。
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人磷酸化AKT 蛋白 ( AKT )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 AKT 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 AKT与单抗结合，加入生物素化的抗人 AKT ，形成免疫
人环磷酸腺苷 ( cAMP )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 cAMP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 cAMP与单抗结合，加入生物素化的抗人 cAMP ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸
