- ￥1300
- Solarbio
- 北京
- BC0745
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Hexokinase(HK) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC0745-100T/96S
- 规格：
100管/96样
己糖激酶（HK）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0745
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二A | 液体3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二B | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二C | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂二D | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
- 试剂二B；临用前加入12mL试剂一溶解，用不完的试剂2-8℃分装保存4周；
- 试剂二C：临用前加入4mL试剂一溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
- 试剂二D：临用前加入4mL试剂一溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
- 试剂二的配制：根据样本量按试剂二A：试剂二B：试剂二C：试剂二D =100μL：500μL：150μL：150μL（5T）的比例配制成试剂二，现用现配；
- 试剂三：临用前取1支，加入0.5 mL试剂一，充分溶解；用不完的试剂-20℃保存2周，避免反复冻融。（该试剂为冻干试剂，可能存在肉眼观察试剂量相差较大甚至量很少的现象，此现象不影响使用，实际质量相同。）
HK（EC 2.7.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH，NADPH 在340nm有特征吸收峰。
Glucose + ATP Glucose-6-Phosphate + ADP
Glucose-6-Phosphate + NADP 6-Phosphogluconolactone + NADPH (340nm)
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 比色皿中反应液的温度必须保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
- 最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
- 不同匀浆组织中HK 活力不一样，做正式试验之前请做1-2次预试验，若ΔA>0.5，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液，或缩短反应时间至2min，使ΔA<0.5，以提高检测灵敏度。注意同步修改计算公式。
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- 称取约0.0508g 鼠肝，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作，用96孔UV板测得计算A1=0.183，A2=0.428，ΔA=A2-A1=0.245，计算己糖激酶活性得：HK活性（U/g 质量）=1071.7×ΔA÷W=5168.632U/g 质量
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- Geng M T, Yao Y, Wang Y L, et al. Structure, expression, and functional analysis of the hexokinase gene family in cassava[J]. International journal of molecular sciences, 2017, 18(5): 1041.
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- Liu Y, Liang X, Zhang G, et al. Galangin and pinocembrin from propolis ameliorate insulin resistance in HepG2 cells via regulating Akt/mTOR signaling[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2018, 2018.
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- [1] Galina A, da Silva WS. Hexokinase activity alters sugar-nucleotide formation in maize root homogenates[J]. Phytochemistry, 2000, 53(1): 29-37.
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文献和实验| AuthorChi Wenna, Kang Na, Sheng Linlin, Liu Sichen, Tao Lei, Cao Xizhi, Liu Ye, Zhu Can, Zhang Yuming, Wu Bolong, Chen Ruiqun, Cheng Lili, Wang Jing, Sun Xiaolin, Liu Xiaohui, Deng Haiteng, Yang Jinliang, Li Zhanguo, Liu Wanli, Chen Ligong | Publish_toNature Communications |
| IF16.6000 | PMID38167945 |
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Cell Metab：浙大吕志民团队揭示肿瘤细胞 Warburg 效应促进肿瘤免疫逃逸
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为8500单位/ml(某些国产试剂为2500单位/ml),其线性范围可以达到50mmol/L某些(国产试剂为0-22mmol/L),国产试剂如果采用葡萄糖氧化酶法，线性范围更低。有时临床上的糖尿病危急病人的血糖值可以达到25mmol/L以上，超过了国产试剂的检测范围，如果要得到准确的结果,必须将标本稀释后复检，无形中延长了出报告和等待的时间，这对于抢救病人非常不利。 CK进口试剂中使用的工具酶---己糖激酶的浓度为16单位/ml(某些试剂中的HK浓度为5.8单位/ml),CK-MB进口试剂中的工具
