线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析)

线粒体膜通透性转换孔，又称线粒体巨型通道（magachannel），是存在于线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道，由多种蛋白质复合组成。线粒体通透性转换孔 (mPTP)可能参与了细胞死亡过程中线粒体成分的释放。

正常的细胞线粒体内膜可维持正常的线粒体电位梯度以保证细胞呼吸作用及能量供应，随着Ca2+的摄入和释放，一种低电导渗透性转换孔在张开和闭合中来回切换。当细胞发生凋亡时和病理性死亡时，线粒体膜电位转换孔渗透性发生改变，Ca2+的过载，线粒体谷胱甘肽的氧化，活性氧水平的升高，包括后继细胞色素C的释放，线粒体膜电位下降等都会导致线粒体渗透性转换孔的激活。

线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒（流式分析）检测方法是一种相对于仅基于线粒体膜电位分析更直接的检测线粒体通透性转换孔开放的检测方法。其原理是：首先通过被动运输加载Calcein AM，后者是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，能够轻易穿透活细胞膜，被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子 Calcein，从而被滞留在细胞内，使胞质包括线粒体发出强绿色荧光。加入CoCl2后，来自胞质的荧光被CoCl2淬灭，仅留下线粒体内的荧光。作为对照，可将细胞加载Calcein AM和CoCl2的同时，对其用离子霉素处理，从而使细胞加载更多的Ca2+，引起线粒体通透性转换孔的激活从而使线粒体荧光淬灭。

本试剂盒以1ml标记体系计算，可供100次检测。检测最大激发波长494nm，最大发射波长517nm。

产品组份：
Calcein AM———————5×50µg
DMSO——————————250µl
CoCl2(80mM)——————1.2ml
Ionomycin(100µM)————750µl
Cell Stain Buffer———2×250ml

储存条件：-20℃避光干燥，避免反复冻融，有效期至少6个月