TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多TdT加尾法DNA探针标记试剂盒等探针标记及检测产品请联系我司咨询订购。

名称：TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货
品牌：百奥莱博
英文名：TdT-Tailing DNA Labeling Kit
编号：BTN90605A
规格：5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3´突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/*仿抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。

TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·水饱和酚
编号：BTN3190
英文名称：Water-Saturated Phenol
规格：100mL
本品是将重蒸馏酚用水充分饱和而得，pH在7左右。水饱和酚不会再吸收样品的水分。本产品可以用于配制TRIzol，也直接用于RNA提取。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

疑难解答：
Q：分子生物学实验为何需要使用饱和酚？
A： 酚跟水有一定程度的互溶，酚水混合液中水相中一般有8-10%的酚，酚相中一般有12%的水，互溶的比例还跟温度、盐离子等相关(比如，65℃时，水和酚彻底互溶，不再分相)。如果使用未饱和的酚处理样品，则分相后样品的体积将减少，所以为了避免样品的丢失，需要使用没有吸水能力的各种饱和酚。

·核酸内切酶V
编号：BTN130640
英文名称：Endonuclease V
规格：250U
核酸内切酶V是在E.coli中发现的一种DNA修复酶。它识别DNA中的脱氧次黄嘌呤核苷，即脱氧腺苷的去*基产物。核酸内切酶V，也称为脱氧次黄嘌呤核苷3´内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷(无论配对与否)的双链或单链DNA 。也可识别含脱碱基(AP)位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对loop环、折叠flaps和类 -Y型结构的DNA，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶V发挥DNA修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA上的脱氧次黄苷或受损碱基。核酸内切酶V对错配脱氧次黄嘌呤核苷3´端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割，切割第二个磷酸二酯键的效率是95%，第三个磷酸二酯键的效率是5%，产生一个3´羟基、5´磷酸的切刻。

产品特点：
➤ 切割错配；
➤ 切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸，对含错配碱基的寡核苷酸亲和力较弱。

产品组成：

成分	规格
核酸内切酶V(10000 U/mL)	25μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：65℃，20分钟。

活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下1小时内，能够切割1pmol含单脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备：合成34bp寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷(dI)碱基。


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·DNA marker(250-15000bp)
编号：BTN70503T
英文名称：DNA ladder(250-15000bp)
规格：50次
 本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5μL。

使用效果：

注：2500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL

疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀，亮度相当，但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色，加大EB浓度等方法解决。


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