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动物细胞裂解液B(变性)

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      Animal Cell Lysis Solution(B)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输、4℃

    • 规格

      100mL

    特别提示:包括动物细胞裂解液B(变性)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:动物细胞裂解液B(变性)
    英文名称:Animal Cell Lysis Solution(B)
    产品货号:BTN80807B
    产品规格:100mL

    本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。

    产品特点:
    1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
    2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
    3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
    4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

    储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。

    注意事项:
    1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
    2. 如果用于信号传递研究,最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
    3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
    4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

    使用方法:

    一:处理贴壁的培养细胞
    1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
    2. 将培养板放置在冰上待用。
    3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
     注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索最佳用量。
    4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
    5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
    6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
    7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

    二:处理悬浮细胞
    1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
    2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同第一步。
    3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
    4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
    5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,最好留20-40μL液体不取。
    6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
    7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

    三:处理组织块
    1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
    2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
    3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
    4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
    5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
    6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

    除了动物细胞裂解液B(变性),,我公司还供应以下相关产品:
     
    货号 名称 规格
    BTN100302 包涵体蛋白溶解及复性套装 100次
    BTN130526 细菌专用蛋白酶抑制剂 1mL
    YT611 RIPA裂解液(弱) 100ml
    SNM416 膜蛋白和胞质蛋白提取试剂盒 50T
    SNM432 WB洗涤液(10×) 100ml
    SNM490 TBS缓冲液(20×) 500ml
    SNM493 防脱载玻片(经多聚赖氨酸处理) 50片
    RFT159 细菌蛋白提取试剂盒 100次
    KFS004 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40X) 125ml
    KFS227 ICAD蛋白检测试剂盒 50T
    SY0329 E-64蛋白酶抑制剂 5mg
    SY0351 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液 2ml
    SY0356 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8 250ml
    SY0436 人β-淀粉样多肽 1-42 1mg
    SY0453 牛血清白蛋白(无DNase、蛋白酶、IgG) 25g
    ZN2924 Tris-glycine-SDS电泳缓冲液(10X粉剂) 10L
    QN1105 剥离硅* 200ml
    QN1162 DAB法显色试剂盒(小鼠IgG) 1盒
    QN1252 4%*聚甲醛 100mL|500mL
    QN1286 变性蛋白预制胶(10%) 10块
    HR0023 胞质蛋白提取试剂盒 50T/100T
    HR0141 线粒体蛋白提取试剂盒 50T/100T
    HR0049 脂肪组织蛋白提取试剂盒 50T/100T
    HR8057 植物蛋白提取试剂盒(去叶绿素) 50T/100T
    HR8136 Western转移缓冲液(5×),NC 500ml
    HR8169 蛋白脱脂肪柱 1个
    GL2506 超氧化物歧化酶(SOD)提取液 500ml

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