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- 2025年07月15日
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- 技术资料
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35
- 英文名：
Metarhiziummajarosporae=Metarhiziumanisopliaevar.Majus
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
(1) 大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养菌群：由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体，具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属：菌种的上一级分类，通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属，如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌最基本的分类单位，通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体，与同属内其他种有着明显差异；当涉及到细菌保存时，菌种是指细菌的种子（用来长期保存）资源。
(4) 菌型：同一菌种的不同细菌，在某些方面存在较小差异的为同一菌型，通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株：由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代，一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
资源名称 大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养
种属 Metarhiziummajarosporae=Metarhiziumanisopliaevar.Majus
安全等级 1
模式菌株 no
应用领域 生物防治用菌。
培养方法
培养基 14
生长条件 25-28℃
低温存法：
①大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。
脱水存法：
①大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。
③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。
保藏方法：
1大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。
2. 液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。
3. 载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5. 冷冻保藏法
可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6. 冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。
以下是大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养的相关产品，也是公司正在热销的产品：
克鲁斯假丝酵母 丁醇梭菌（丁醇杆菌）
扣囊内孢霉 金霉素链霉菌
刺孢吸水链霉菌 马链球菌兽疫亚种
皮状丝孢酵母 金黄色葡萄球菌(敏感菌株)ATCC25923冻干粉
金黄色葡萄球菌 粉红木霉
地生翅孢壳 孔雀石绿链霉菌
头状丝孢酵母 苏云金芽胞杆菌托马诺夫亚种Bacillusthuringiensissubsp.toumanoffii
铜绿假单孢菌 大肠埃希氏菌
紫云英根瘤菌 青色链霉菌
嗜酸乳杆菌 洋葱伯克霍尔德氏菌
BOC-L-谷氨酸Boc-L-Glutamic acid型号2419-94-5作用；生化研究
BOC-D-谷氨酸BOC-D-Glutamic acid多少钱34404-28-9作用；生化研究
BOC-D-苯甘氨酸Boc-D-α-phenylglycine品牌3
BOC-L-苯甘氨酸Boc-L-α-phenylglycine规格2900-27-8作用；生化研究
BOC-L-异亮氨酸BOC-L-Ile型号13139-16-7作用；生化研究
锌试剂/5-(2-羧基苯基)-1-(2--5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐/2-羧基-2′-氢基-5′-磺苯单钠盐/邻[2-（2--5-磺基苯偶氮）亚苄基]肼基苯单钠盐/锌单钠盐/Zincon;AR;5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;62625-22-3或56484-13-0;RT
磷钨酸/磷钨酸水合物/钨磷酸水合物/12-钨磷酸水合物/Phosphotungstic acid hydrate;AR;100克国产;12501-23-4;RT
利英钠克盐/二氨基四硫代酸铬铵/四硫基二氨络铬酸铵/雷氏盐/利英纳克盐/赖纳克氏盐/铬铵/Reinecke salt;AR;25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;13573-16-5;RT
亚硝基红盐/亚硝基-R-盐/1-亚硝基-2-萘-3,6-二磺酸/4-亚硝基-3--2,7-萘二磺酸二钠/亚硝基R盐/试钴铁灵/1-亚硝基-2-萘酚-3，6-二磺酸钠/试钴铁灵/亚硝基R盐/Nitroso R salt;AR;25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;
双硫腙/硫代羰偶氮苯/打萨宗/二苯磺卡贝松/铅试剂/硫碳酰偶氮苯/二苯基硫代卡巴腙/二苯基硫巴腙/二苯硫代偶氮碳酰肼/二苯硫代缩(对称)二氨基脲/二苯基硫卡巴腙/二苯基硫代二氨基脲/2-苯基酰肼苯基二氮烯硫代羧酸/打萨腙/二苯硫代卡贝松/二苯硫卡巴腙/Dithizone;AR;5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;CAS:
大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种培养十二烷基-β-D-麦芽糖苷DDM69227-93-6含量：≥98.0%
3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷Indoxyl-Gal126787-65-3含量：≥98.0%
粘液酸MTPA526-99-8含量：≥98.0%
辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷Octyl thioglucoside85618-21-9含量：≥98.0%
酵母聚糖AZymosan A from Saccharomyces cerevisiae58856-93-2含量：≥98.0%
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文献和实验是接头引物处于“Y”接头的2个分叉单链上，序列与接头一样，只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后，接头引物才能退火参与扩增，流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究，并取得了成功，建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上，利用YADE法，克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组DNA ，然后与“Y”形接头相连，取连接产物做模板，先以基因
、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、长刺毛壳、 球毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、多主枝孢、束状刺盘孢、葫芦科刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、蚀脉镰孢霉、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、瓶毛壳、金龟子绿僵菌、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、淡紫色拟青霉、拟青霉、白腐菌、少根根霉、根霉属的菌、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、台湾根霉、日本
与接头一样，只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后，接头引物才能退火参与扩增，流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究，并取得了成功，建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上，利用YADE法，克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组 DNA，然后与“Y”形接头相连，取连接产物做模板，先以基因特异引物1做线性扩增，再以线性扩增产物为模板，以接头引物和基因特异引物2做指数
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