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- 2025年10月08日
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朗智（上海）生物科技有限公司
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流式细胞周期检测
细胞周期检测
细胞周期可以分为G0/G1期二倍体、G2/M期四倍体和DNA复制的S期，核酸染料如PI、DAPI等染色后不同时期的细胞插入的核酸染料含量不同，流式检测后根据荧光强度的不同，能检测到二倍体、四倍体和S期细胞的百分比。
图1 细胞株消化后70%乙醇固定过夜，RNase/PI染色液孵育半小时后，流式检测到cell cycle百分比。
图2 细胞株经不同处理后，PI染色分析细胞周期，处理组明显有细胞增殖和四倍体阻滞现象。
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文献和实验：做流式细胞时，PI 染色，PI的浓度应该是多少?还有就是400目的筛网是什么？不用可以吗？谢谢。 A：100ug/ml，一般用400目的筛网是用来将粘在一起的细胞团滤掉的，否则会出现人为的多倍体干扰，分析的时候需要的是单个的细胞，不过如果经验丰富也可以gate掉的。如果你没有条件，建议在染色之前将细胞弹的很散，再进行染色 10、Q：流式细胞仪观察细胞周期样品怎样准备？ A：给你介绍一下我的实验方法，我做的是周期检测，要做平行样，六孔板做的。 （1）收集先弃液，将你要实验（你已经处理
量为35~36kD的Ca2 +依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 2、Q：用流式作细胞凋亡为什么跟tunel差别那么大啊？？tunel测出来的细胞凋亡率大概有30%而作流式测出来的凋亡率只有2%（阴性
脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 2. Q：用流式作细胞凋亡为什么跟tunel差别那么大啊？ A：tunel测出来的细胞凋亡率大概有30%而作流式测出来的凋亡率只有2%（阴性对照0.5%）差别好大啊，用的是beckman公司的Annexin V /PI双染试剂盒，实验步骤如下：
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