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996
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
特别提示:包括抗 CBD 单克隆抗体在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:抗 CBD 单克隆抗体
产品规格:0.05ml
特性:
单柱纯化且无需使用蛋白酶
目的蛋白质不含来自载体的*基酸
可融合到目的蛋白的 N 端或 C 端
重组蛋白的连接或标记
可分离有或无 N 端甲硫*酸的蛋白
关于产品详细描述和 pTXB1 和 pTYB21 载体图谱,包括 MCS(多克隆酶切位点),请见目录 355-356 页。载体序列文件请联*(代"系")我们咨询 查询。
概述:
IMPACT(Intein Mediated Purificaiton with an Affinity Chitin-binding Tag)试剂盒利用经改良过的蛋白剪接元件(内含肽)进行一步亲和纯化重组蛋白(图1)。该系统与其它蛋白融合表达系统的主要区别在于:无需蛋白酶作用,即可将重组蛋白与其亲和标签(Tag)分离。
IMPACT 试剂盒能够融合表达含有内含肽及几丁质结合结构域(CBD)的蛋白,融合标签可以融合到目标蛋白的 C 端(pTXB1)或 N 端(pTYB21)(图 2)。在硫醇试剂(如 DTT)的参与下,内含肽进行特异性的自我剪切,释放出目的蛋白。pTXB1 载体还可用于表达和纯化 C 端含硫脂键的蛋白,并用于内含肽介导的蛋白连接(IPL,图 3)。IPL 反应,即表达蛋白连接,可通过一种天然肽键将 N 端为半胱*酸的多肽或蛋白和一段细菌表达出的 C 端硫脂键蛋白连接起来,此反应可用于蛋白标记或半合成。有关 IMPACT 系统和 IPL 的更多信息请联*(代"系")我们咨询 查询。
pTYB21 的内含肽标签包含酿酒酵母(Sce)VMA1 内含肽和几丁质结合域融合在目的蛋白的 N 末端。
pTXB1 是大肠杆菌表达载体,携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽[Mxe GyrA 内含肽,22 kDa]。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌(Bacillus circulans)的几丁质结合域(CBD)一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠(S6651)结合。使用硫醇试剂(如 DTT)或 MESNA(2-mercaptoethanesulfonic acid)(后续连接用)诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
iMPACT 试剂盒组成l
– 大肠杆菌表达载体:pTXB1、pTYB21 和 pMXB10 对照载体
– 几丁质珠:纯化融合蛋白的亲和基质(结合容量 = 2 mg/ml)
– 抗 CBD 单克隆抗体
– DTT 与 SDS 上样缓冲液
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文献和实验以单克隆抗体为基础的免疫治疗 第1代单抗诞生于1975年,来源于小鼠的B细胞杂交瘤,称为鼠源单抗。但人的免疫系统会识针对此类识别单抗产生人抗鼠抗体,将其清除出体外而限制了它的应用。随后研制了人源化单抗,并于1988年进行了第1次商业性的临床试验。人源化单抗与鼠源单抗相比,具有以下的优点:特异性较强;不易发生过敏反应及免疫复合性疾病;在人体内维持的时间较长;可制备用于人的抗独特型抗体。制备人源化单抗可以采用人―鼠杂交瘤技术、人―人杂交瘤技术、EB病毒转化技术、EB病毒转化
抗体的检测外,还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验,方法可用ELISA、IFA法。例如:①制备抗黑色素瘤细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体,应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应,其次是与其它细胞因子间有无交叉。 2.McAb的Ig类与亚类的鉴定 一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型
的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体. 单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。 如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠
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