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文献和实验一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
1~6),与阳性对照(含有OSsec27p的质粒)一致(Lane 8),而阴性对照(野生型烟草基因组DNA)中未出现(Lane 7),说明结果可信。但还需要用斑点杂交的方法进一步确认其序列信息。 2.2 PCR-dot-blot 将1~4号及7号PCR产物回收纯化除去引物,与OSsec27p的DNA溶液一同调整DNA浓度约为20ng/μl,一同用芯片点样仪点于尼龙膜上(斑点直径约500~780μm),每次点样均设置阳性和阴性对照,各样品的位置如图2左侧所示。然后以生物素标记的OSsec27p
「小身体,大智慧」Cell 重磅揭示大肠杆菌染色体折叠模式及影响因素
Interconnecting solvent quality, transcription, and chromosome folding in Escherichia coli 的论文,揭示了大肠杆菌中的染色体折叠规律。图片来源:Cell在本研究中,作者采用细胞的简单聚合物物理学视角,将细胞质视为聚合物溶液,其中聚合物是 DNA,溶剂是细胞质中的其他所有物质(例如,水、代谢物、蛋白质、核糖体和 RNA)。根据聚合物-溶剂相互作用,溶剂的质量大致分为三种类型:理想、良好和差。在良好效应的溶剂中,聚合物和溶剂之间的相互
以 100~400nt 为宜,过长则杂交效率减低。最近研究结果表明,寡核苷酸探针(16~30nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针。因此,寡核苷酸探针和不对称 PCR 标记的小 DNA 探针或体外转录标记的 RNA 探针是组织原位杂交的优选探针。二、液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中,一种研究最早且操作复合的杂交类型,在过去的 30 年里虽有时被应用,但总不如固相杂交那样普遍。主要缺点是杂交后过量的未杂交探针在溶液中除去较为困难和误差较高。近几年由于杂交检测技术的不断
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