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文献和实验brucewu1986 我挑的阳性克隆(已检测),在加有抗生素的摇瓶中培养后,放在4度冰箱一天,枪头蘸取少量,6ml加相应抗生素管摇过夜,菌液浑浊,kit小提,测浓度约150ng/ul,但电泳检测看不到条带,酶切电泳也看不到,会不会是质粒丢失?但为啥可以在抗生素的培养基中生长? 目的片段2.5kb,载体6k 各位战友有没有遇到这种情况 woxingwosu 我觉得一般情况下,质粒丢失的几率比较低
为了方便理解,这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液: 溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0; 溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS; 溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。 1、溶液I: 任何生物化学反应,首先要控制好溶液的pH,因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液,是再自然不过的了。那么50
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