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亚细胞组分是由复杂的蛋白复合物组成的较均一的组分,因此可用于促进蛋白质组分析。使用Thermo Scientific细胞器富集试剂盒可以从细胞和组织中富集完整的溶酶体、过氧化物酶体和细胞核。每种试剂盒均使用梯度密度离心方法分离细胞器。分离的细胞器可用于2D/MS、电子显微镜、疾病分型、基因表达、信号转导以及相互作用或者定位研究等众多的下游应用。
产品特点:
- 简单、高效–使用试剂盒中的试剂和差速离心的方法可以简单高效地分离细胞器。
- 相容性强–制备的样品可用于2D/MS、电子显微镜、疾病分型、基因表达、信号转导以及相互作用或者定位研究等下游应用。
- 得率高–试剂盒内的成分足以完成25次富集。
Thermo Scientific 细胞器富集试剂盒是一种方便、快速的样品制备方法
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目标细胞器
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样品来源
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Optiprep*密度梯度
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离心速度
(g)
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离心时间(分钟)
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溶酶体
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细胞
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15%, 17%, 20%,23%,
27% 及30%
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145,000
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120
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软组织及硬组织
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过氧化物酶体
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软组织
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27.5%, 30%及35%
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180, 000
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90
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硬组织
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18%, 20%,及27.5%
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180, 000
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90
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细胞核
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软组织和硬组织
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7%, 23%,及27.5%
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40,000
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90
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从组织中富集溶酶体。通过用于组织和培养细胞的溶酶体富集试剂盒来处理肝脏和肾脏组织(每个样品200mg)。利用蛋白免疫印迹来分析总裂解液和分离的溶酶体中的溶酶体标志性膜蛋白Lamp-1。
从组织中富集过氧化物酶体。通过用于组织的过氧化物酶体富集试剂盒来处理肝脏和肾脏组织(每个样品300mg)。利用蛋白免疫印迹来分析总裂解液和分离的过氧化物酶体中的过氧化物酶体标志性膜蛋白PMP70。
从组织中富集细胞核。通过用于组织的细胞核富集试剂盒来处理肝脏和肾脏组织(每个样品400mg)。利用蛋白免疫印迹来分析总裂解液和分离的细胞核中的细胞核可溶标志性蛋白-组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)。
富集的细胞器中的交叉污染。通过Thermo Scientific Pierce细胞器富集试剂盒来处理肝脏和肾脏组织(每个样品200mg),然后利用蛋白免疫印迹来分别检测线粒体的标记物COX4和过氧化物酶体的标记物PMP70。根据蛋白的量对样品进行标准化(总蛋白大约10μg),过氧化物酶体实验中的肝脏和肾脏组织是利用体积进行标准化的。利用供应商S的相似试剂盒并按其说明进行实验,两组实验所用的大鼠为相同年龄、相同重量。在利用供应商S的试剂盒制备的溶酶体和细胞核组分中发现了大量的污染。
更多产品链接:http://www.thermo.com.cn/Product4503.html
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