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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
a904l
- 库存:
10
- 供应商:
雅吉生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
详见説明
- 物种来源:
人,小鼠,大鼠等物种
- 细胞形态:
上皮
- 器官来源:
a904l
- 运输方式:
顺丰速运
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁或悬浮
- 规格:
1×10^6cells/T25培养瓶
人肝内胆管上皮细胞HIBEpiCs-SV40T收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基,以便进行对比培养,换液后将瓶盖拧松)
细胞培养步骤
a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,传代具体步骤如下:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

b、细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
C、细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
注意事项:有些细胞贴壁不牢,在运输过程中容易发生细胞脱落,这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
人肝内胆管上皮细胞HIBEpiCs-SV40T售后条款:
1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

2)细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
1. 客户造成细胞污染,不重发;
2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;
6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;
7. 视具体情况而定。
欢迎新老客户咨询订购:人肝内胆管上皮细胞HIBEpiCs-SV40T
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文献和实验一光年 最近要做生殖的细胞方面的实验,前期一直用在垂体细胞原代培养,但是一直困扰没有促性腺激素细胞系,但是在网络中搜索,发现老外的文章中经常提到αT3-1,LβT2 或LβT4细胞系,在ATCC等知名的细胞库也未发现这些细胞系,不知道各位高手指点在哪里可以找到这几种细胞系?不甚感激!! veimojie 我一直也在做这方面的研究 什么地方能有啊 ? banana_smile 我也想做这方
发现于肝脏和酵母中,是鼠乳汁分泌的必需因子( L因子,泌乳因子)(中原和郎, 1934),对人的效果不肯定,以后清楚此因子无论其化学结构还是作用机理都是由二种不同的维生素 L1 邻氨基苯甲酸( anth- ranilic acid)和 L2 (腺嘌呤硫代甲基戊糖)组成的(中原和郎, 1945)。但 L效果没有确实的证明,因此把它作为独立的维生素看来是有问题的。
Lagging strand of DNA (DNA后随链):总体上沿着3¢到5¢方向延伸,但以小片段形式(5¢-3¢) 不连续合成,最后共价连接起来。 Lampbrush chromosomes (灯刷染色体):在两栖卵母细胞内发现的减数分裂大染色体。 Lariat (套索):RNA 剪接过程中的中间结构,其中有由5¢-2¢键形成的带尾巴的环形结构。 Late period of phage development (噬菌体发育晚期):噬菌体DNA 复制后的部分感染
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