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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
ATCC
- 库存:
1
- 细胞类型:
上皮细胞样
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
ATCC
- 相关疾病:
肿瘤研究等
- 物种来源:
ATCC
- 免疫类型:
ATCC
- 细胞形态:
不规则梭形
- 器官来源:
ATCC
- 运输方式:
顺丰快递
- 年限:
理论永生化
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
T25/1*10^6
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我司绝大多数人源细胞系均可提供STR鉴定报告,如下图示例:

细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基,以便进行对比培养)
客户收到细胞也可以向我司索取细胞图,如下为人浆细胞白血病ARH-77细胞图:

人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞图如下:

皮肤成纤维原代细胞培养步骤
细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,传代具体步骤如下细胞传代:
A1、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
A2、悬浮细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,将T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中1000rpm
离心5min;
2、弃上清,沉淀细胞加入1ml/支的雅吉生物无血清冻存液(C7001),混匀后加入冻存管中。(如:冻一支,加入 1ml 无血清冻存液即可)
3、将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱存
放 24 小时以上。
B1、对于贴壁细胞,传代可参考如下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
B2、贴壁细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
皮肤成纤维原代细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
如需细胞培养基,亦可联系我司购买,量大从优:

皮肤成纤维原代细胞注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
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欢迎新老客户咨询订购:皮肤成纤维原代细胞
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文献和实验基因治疗中的皮肤成纤维细胞途径 与骨髓细胞 相比,皮肤成纤维细胞用作基因治疗靶细胞的研究起步虽晚一些,然而由于皮肤成纤维细胞在获得、培养以及移植等方面的便易性,它在基因治疗中的发展很快。 皮肤成纤维细胞容易获取,对培养要求低,操作技术难度小,在普通实验室中容易推广。原代成纤维细胞具有较强的扩增能力,能够迅速传代40―50代次,扩增数百万倍以上。成纤维细胞在体外扩增之后也容易植回体内,还可根据需要重新取出。此外,成纤维细胞对基因转移载体要求较低,基因转移效率
我养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长,所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底,也就是细胞与细胞之间没有间隙时,就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液,用D-Hanks液洗两遍,再加入0.25%的胰酶,加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底,然后静置两分钟左右,最好是能在显微镜下观察,当细胞之间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶,加入含
美少女福音!Science 重磅报道,他们率先实现皮肤无疤痕愈合
内容: 成纤维细胞,在伤口愈合中承担着关键的作用。它们不仅负责肉芽组织的形成,还需要重塑愈合后皮肤纤维。遗憾的是,这种纤维的重塑,永远无法达到受伤前的状态,这就是留疤的原因。 近年来,学术界在皮肤中发现了多种成纤维细胞谱系,它们在伤口过程中承担着不同的作用。进行本研究的团队,在 2015 年发表的研究中,将伤口愈合过程中的成纤维细胞分为了两类。一种为不表达 Engrailed-1 的细胞(ENFs),一种为表达 Engrailed-1 的细胞(EPFs),EPFs 在伤口中广泛存在。 图片来源
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