SDS-PAGE蛋白质低分子量标准(14400～97400，

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）

的，可以用SDS-凝胶电泳法测定其分子量。 SDS-PAGE有连续体系及不连续体系两种，这两种体系有各自的样品溶解液及缓冲液，但加样方式，电泳过程及固定、染色与脱色方法完全相同。三、器材与试剂： 1．器材： ①夹心式垂直板电泳槽，凝胶模（135×100×1.5mm）（北京六一仪器厂）　　②直流稳压电源（电压300～600V，电流50～100mA）　　③吸量管（1，5，10ml）              　　④烧杯（25，50，100ml）　　⑤细长头的滴管                      

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

，培养皿（120mm），脱脂棉，棕色试剂瓶，吸液管，吸耳球，玻璃纸，坐标纸。 2．试剂： 重蒸水，丙烯酰胺（重结晶），甲叉双丙烯酰胺（重结晶），过硫酸铵，TEMED（四甲基乙二胺），载体两性电解质（pH3.5～10），考马氏亮蓝R250，液体石腊，乙醇（95%），硅油，磺基水杨酸，三氯乙酸，甲醇，乙酸（36%），已知pI蛋白质样品和标准等电聚焦样品（市售），磷酸，氢氧化钠。 3．溶液配制： （1）单体贮液：丙烯酰胺2.91g，甲叉双丙烯酰胺0.9g，重蒸水溶解，定容到100ml，过滤

琼脂糖凝胶电泳实验技巧

4 结果分析 较成功的电泳结果是分子量标准条带整齐清晰，样品条带也整齐清晰，如果条带模糊暗淡，单从琼脂糖凝胶电泳角度来说，可能的原因：溴化乙锭的质和量怎样?溴化乙锭见光易分解，母液配制时间过长或保存不当(一般4℃ 避光保存一年内有效)，或者终浓度没达到0．5 vg／ml；电泳槽中缓冲液使用次数过多，缓冲能力下降。特别是TAE缓冲液，一般用2～3次就要更换，TBE缓冲液则可使用10次左右。 实际工作中经常发现DNA 分子量标准小片段模糊不清，那足因为琼脂糖凝胶浓度一般不会超过2 0％ ，较小