AO/PI双染试剂盒

Annexin V 流式检测细胞凋亡的数据分析方法

示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC

红细胞残留的PBMC精确计数和活性分析

%），4个样品低轻度污染（低于10%）。 2、AO/PI双染活/死细胞进行自动计数AO和PI是荧光核酸染料，检测细胞的活性。AO是一种细胞膜透过性染料，染总细胞，发绿色荧光;，PI不具有细胞膜通透性，染死细胞，发橙/红色荧光。当死细胞同时包含了AO和PI，发生荧光共振能量转移，AO发散的荧光被PI吸收，因此，只有活细胞才发绿色荧光。此外，成熟的血小板和红细胞是无核的，不能被荧光染料着色，完全排除。AO/PI混合液20ul和白细胞样品20ul，按照1：1的比例混合，通过Cellometer细胞计数仪计数

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

，一般是高压汞灯光源；其次要选择好模块，不同的染料需要不同的激发波长和阻断波长，使用紫外光源时要将可见光源暂时关闭。 请教可与AO/EB染色法达到同样效果的方法 sxh: 因为EB毒性太强，所以想请教各位有没有其它毒性较小的染料，同样可以区分凋亡与坏死的细胞，或者单用AO可不可以区分，有没有用AO/PI双染的? maokai123: 有一种hochest染料可以替代。单独用ao可以区分凋亡和不凋亡的，aoeb的优点是利用凋亡不同阶段个细胞器对染料通透性差异可以区分每个细胞凋亡的程度是早期还是晚期染