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- 文献和实验
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172
- 英文名:
Dispase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100g|250g
特别提示:包括中性蛋白酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:中性蛋白酶
英文名称:Dispase
产品货号:Y12890
产品规格:100g|250g
CAS:9068-59-1
活力定义:1g固体酶粉(或1ml液体酶),在40℃、pH 7.5条件下,1min水解酪素产生1μ g酪氨酸为一个酶活力单位。
适用pH:6.0-8.0zuì佳:7.5
适用温度:10-60℃zuì佳:45 ℃
性状:黄褐色粉末。易溶于水。用微生物生产的中性蛋白酶,大多数是金属酶,一分子蛋白酶中含一原子锌,是微生物蛋白酶中zuì不稳定的酶,易自溶,会造成分子量的明显减少。
分子量:35000~40000。
等电点:8~9。
储存条件:2~8℃
溶解性:易溶于水
用途:提取多糖和水解各类植物蛋白。中性条件下,催化分解蛋白质或高分子肽键,其产物为小分子的蛋白胨、小肽以及个别的氨基酸
除了中性蛋白酶(BR,100u/mg,枯草杆菌),分散酶,,我公司还供应以下相关产品:
名称:乙醇脱氢酶
货号:YT538
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的乙醇脱氢酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化氧化伯醇和二级醇成为醛和酮
CAS:9028-12-0
酶促反应:an alcohol + NADP+ = an aldehyde + NADPH + H+
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
名称:亮氨酸脱氢酶(LEDH)(EC1.4.1.9)
货号:SNM573
规格:5KU
名称:IgG Fab切割酶
货号:JN0166
规格:1000U|5000U
本酶为一种新型的高特异性高活性Fab切割酶,通过大肠杆菌表达,经多步纯化获得。该酶能对人、鼠、绵羊、山羊等物种不同亚型的免疫球蛋白IgGs进行快速单位点酶切。该酶的酶切位点位于免疫球蛋白IgG铰链区的上方,酶切产物为Fab片段和二聚体Fc片段。与木瓜蛋白酶,无花果蛋白酶,胃蛋白酶等相比,FabCutter I Protease具有酶切位点单一,切割快速等优点。
FabCutter酶切体系缓冲液的zuì适pH值为6.5-8.0(表一),zuì适反应温度为37℃,另外该酶发挥活性需要还原剂(表二)。
活性定义:在10 mM Tris, 150 mM NaCl,2mM DTT,pH 7.4的反应体系内,37℃反应1小时,一个单位的酶能将1μg的人源IgG切割95%以上。
应用实例:
One unit cleaves≥95% of 1μg human IgG1 when incubated in 10 mM Tris,150 mM NaCl,2mM DTT,pH 7.4 at 37℃ for 1 hour as monitored by SDS-PAGE.
1: Human IgG;2: Human IgG cleaved by FabCutter I;M: Protein Marker;
表一:可供选择的反应缓冲液及pH
| 兼容 Buffers | pH |
| PBS | 6.5-8.0 |
| Tris Buffer | 7.0-8.0 |
| Sodium Acetate Buffer | 6.5* |
*pH在6.5以下要增加酶的用量。
表二:可供选择的还原剂
| 还原剂 | 浓度(mM) | pH值 |
| DTT | 1-5 | 6.5-8.0 |
| TCEP | 1-5 | 6.5-8.0 |
| Cysteine | 50-100 | 6.5-8.0 |
| Cysteamine | 50-100 | 6.5-8.0 |
| Mercaptoethanol | 50-100 | 6.5-8.0 |
溶解方法:
1、溶解前低速离心,使冻干粉末聚集于管底。
2、用无菌ddH2O溶解,1000U酶加入20μl无菌ddH2O,5000U酶加入100μl无菌ddH2O,配制成酶活性为50U/μl的溶液。
3、低速离心,使溶液汇聚于管底。
操作方法:
1、按照溶解说明将冻干粉溶解,配制成为50U/μL的溶液。
2、待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里,建议浓度为0.5-10mg/ml。
3、按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里,加入还原剂激活酶的切割反应,通常在中性pH条件下加入1-5Mm DTT或者TCEP。
4、37℃酶切1个小时,取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。
注:可使用本品中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果,用70μl ddH2O配制成1mg/ml的蛋白溶解,取50μl加入1μl的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。
储存条件:-20℃。
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文献和实验Preparation of low density, collagenase-digested splenocytes Protocol
1. Dilute 2 ml of 4000 U/ml Collagenase D as follows: 1 ml into 9 ml HBSS/Ca2+/Mg2+ (=400U/ml) and 1 ml into 39 ml HBSS/Ca2+/Mg2+ (=100U/ml). Put on ice. 2. Place 5 ml of the 100U/ml solution in a 10 cm dish. Over a dry dish, inject spleens
Preparation of Low Density, Collagenase-Digested Splenocytes (Hedrick Lab, UCSD Cancer Center)
1. Dilute 2 ml of 4000 U/ml Collagenase D as follows: 1 ml into 9 ml HBSS/Ca++/Mg++ (=400U/ml) and 1 ml into 39 ml HBSS/Ca++/Mg++ (=100U/ml). Put on ice. 2. Place 5 ml of the 100U/ml solution in a 10 cm dish. Over a dry dish, inject spleens
Preparation of low density, collagenase-digested splenocytes Protocol
Preparation of low density, collagenase-digested splenocytes Protocol 1. Dilute 2 ml of 4000 U/ml Collagenase D as follows: 1 ml into 9 ml HBSS/Ca++/Mg++ (=400U/ml) and 1 ml into 39 ml HBSS/Ca++/Mg++ (=100U/ml). Put on ice
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