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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
pH =3.5 ± 0.1
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文献和实验或者 Mowiol 封片。 氨乙基咔唑 氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于 DAB,但可用于 DAB 反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。 1. 需要的溶液和特殊设备 0.4% AEC用 N,N —二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L 乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol 或 Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。 2. 操作步骤 (1) 用 l mL DMF 溶解 4 mg AEC。AEC
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
。(7)加等体积的氯仿于液相样本中,颠倒混合,13000r/min离心1min。(8)取液相加入2倍体积冰冷的纯乙醇和1/10体积的3mol/l的乙酸钠,冰浴30min。(9)4℃13000r/min离心10分钟,弃上清,重悬于1ml的70%乙醇中。(10)4℃13000r/min离心10分钟,尽可能弃上清。(11)常温干燥30min,重悬于50μl的1×TE。(12)于260nm和280nm测定DNA含量。
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