霉菌和酵母菌显色平板9cm（2-8℃）

【原创】miRNA Northern Blot实验步骤

素标记），42℃旋转振荡过夜。 （4）用20ml杂交缓冲液洗膜一次。 （5）倒掉溶液，加入4ml预热的杂交缓冲液，同时加入8μl与miRNA探针配套的“Amplifier”，42℃旋转振荡2h。（这一步是多生物素信号放大技术提高检测灵敏度的关键，如果是普通的试剂则跳过这一步骤） （6）用20ml杂交缓冲液洗膜一次。 （7）加20ml洗涤缓冲液，42℃旋转振荡30min。 5、信号检测 （1）用镊子将膜从杂交管中取出，放入显色盒（或者是可以容纳整张膜的容器）中，注意不要将膜重叠

工业微生物产生菌的分离筛选（四）

保藏，供进一步筛选。2. 培养基的pH细菌、放线菌的生长繁殖对pH一般要求偏碱，霉菌和酵母菌要求偏酸。因此，分离培养基的pH应该调节到被分离微生物要求范围。这不仅有利于自身生长，也可排除一部分不需要的菌类。例如，分离柠檬酸产生菌的黑曲霉，就是利用调节培养基的酸碱度获得成功的。其分离方法是：取红芋粉醪20%、柠檬酸10%～20%配成培养液，调节pH2.0～2.5，以一定量的培养基和土样均匀混合，用毛细吸管点种在平皿内事先覆盖的无菌滤纸上（2～3层），于30℃培养，这样可以分离到产生柠檬酸的黑曲霉

标准菌株验证鉴定步骤

菌种活化：干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株；   1.1    金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株： 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中，划线接种于营养琼脂平板上，36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌：菌落凸起，圆形，不透明； b. 大肠埃希氏菌：菌落稍凸，圆形，湿润，乳白色； c. 铜绿假单胞菌：菌落扁平，圆形，边缘不整齐，光滑湿润，可产生蓝绿或黄绿色素； d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明