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NEB Golden Gate 组装混合液         

                 
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  • ¥200 - 400
  • NEB
  • 美国
  • #E1600S
  • 2025年07月12日
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      -20

    • 保质期

      1年

    • 英文名

      NEB Golden Gate 组装混合液                          

    • 库存

      999

    • 供应商

      上海淳麦

    • 规格

      1000U/10000U

    BsaI
    #R0535V 500 units . . . . ¥359
    #R0535S 1,000 units . . . . ¥679
    #R0535L 5,000 units . . .¥3,079

    BsaI-HF
    #R3535V 500 units . . . . ¥359
    #R3535S 1,000 units . . . . ¥679
    #R3535L 5,000 units . . .¥3,079

    BbsI
    #R0539V 150 units . . . . ¥359
    #R0539S 300 units . . . . ¥679
    #R0539L 1,500 units . . .¥3,079
    BsmBI
    #R0580S 200 units . . . . ¥739
    #R0580L 1,000 units . . .¥3,339

    T4 DNA 连接酶
    常规浓度
    (400,000 粘性末端 units/ml)
    #M0202V 10,000 units . . . . ¥389
    #M0202S 20,000 units . . . . ¥739
    #M0202L 100,000 units . . .¥3,029
    高浓度
    (2,000,000 粘性末端 units/ml)
    #M0202T 20,000 units . . . . ¥739

    #M0202M 100,000 units . . .¥3,029 

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    T4 DNA 连接酶
    常规浓度
    (400,000 粘性末端 units/ml)
    #M0202V 10,000 units . . . . ¥389
    #M0202S 20,000 units . . . . ¥739
    #M0202L 100,000 units . . .¥3,029
    高浓度
    (2,000,000 粘性末端 units/ml)
    #M0202T 20,000 units . . . . ¥739

    #M0202M 100,000 units . . .¥3,029 

    特性

     无痕克隆 - 组装后无额外碱基存在
     可用于组装重复区
     兼容片段长度广(>15 kb 至 <100 bp)
     有效组装高 GC 区 

    概述

    Golden Gate 可高效、无痕的克隆组装 DNA 片段,该方法起始于 1996 年,这是第一次使用 IIS 型限制性内切酶的和 T4 连接酶顺序或同时的活性将多个目的基因插入到同一个载体骨架上。这类核酸内切酶产生用户确定唯一的末端序列,该内切酶在识别位点之外进行切割。产生可连接的 DNA 突出末端,临近的互补 DNA 末端退火。一旦组装上,结构中内切酶的识别位点已经不存在。因为每一个互补可连接的 4 碱基突出端都是钝端(内切酶识别位点已经不存在),目的组装产物随时间逐渐积累。特别适用与多重组装实验,例如 TALEs (Transcription Activator Like Effectors)(5)和 TALENs(TALEs fused to a FokI nuclease catalytic domain)(6)。Golden Gate 方法也适用于单一目的基因的克隆实验。


    Golden Gate 组装需要需要 IIS 型内切酶识别位点,图例中为 BsaI(GGTCTC)加在双链 DNA 片段末端。然后在识别序列外酶切,每个片段产生 4 碱基突出末端,直接用于组装。 

     

    NEB Golden Gate 组装混合液包含

    - NEB Golden Gate 组装混合液
    - Golden Gate 反应缓冲液(10X) 

    质保声明

    NEB Golden Gate 组装混合液经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

    参考文献

    关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 


    产品细节图片1
       南京赛泓瑞生物科技有限公司是专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的专业性生物科技公司。本着服务科学的理念,赛泓瑞建立了生命科学研究工具的研发、生产、销售及技术服务平台,现已有数万余种产品,并每年不断开发新产品,为广大的生命科学研究人员、医学、药学、农业、环保等的科研人员提供科研工具性产品及技术服务.
    经营范围:抑制剂、ELISA试剂盒、原代细胞和细胞株、化学试剂、蛋白、抗体、分子试剂和试剂盒。

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    • 作者
    • 内容
    • 询问日期
    图标文献和实验
    相关实验
    • Determining the Direction of Replication Fork Movement

          For an in-depth review of the method, see Friedman, K. and B. Brewer (1995) Analysis of replication intermediates by two-dimensional agarose gel electrophoresis. Meth. Enzymol. 262 : 613-627. Two dimensional agarose gels

    • Inverse PCR & Cycle Sequencing 

      (Sau3A I, HinP1 I, or Msp I--done separately) Set up 2 separate digestions:   Genomic DNA (~2 flies) 10.0ul 10X buffer (NEB Sau3A or NEB 2) 2.5ul 100 ug/ml RNase

    • 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)

      分数50%硫酸葡聚糖(DS):65oC水浴中融化,4oC或-20oC保存。6)杂交液:8µL体积分数25%DS,20µL 20×SSC混合。(或40µL体积分数50%DS,20µL 20×SSC,40µL ddH2O混合)取上述混合液50µL,与5µL DF混合即成。其终浓度为体积分数10%DS,2×SSC,体积分数50%DF。7)PI/antifade溶液PI原液:先以双蒸水配置溶液,浓度为100µg/mL,取出1mL,加39mL双蒸水,使终浓度为2.5µg/mL。Antifade原液:以PBS

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