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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
1年
- 英文名:
T4 DNA 连接酶
- 库存:
999
- 供应商:
上海淳麦
- 规格:
1000U/10000U
RNA 和 DNA 的连接
特性
RNA 和 DNA 的连接
概述
该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。
来源
纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
反应条件
1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP] 推荐 DNA 5´ 末端浓度为 0.1-1.0 μM,16℃ 温育。
热失活
65℃ 加热 10 分钟。
质保声明
T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义(粘性末端活性单位)
1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM(300μg/ml)] 连接所需的酶量。
浓度
400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。
注意事项
与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同,T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。若需稀释 T4 DNA 连接酶,推荐使用 50% 甘油贮存缓冲液(稀释缓冲液 A,NEB #B8001)稀释,-20℃ 保存。如稀释后马上使用,也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加 1 mM ATP,连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在 T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。
参考文献
该产品的特性和应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类,极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

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