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- 联迈生物
- LM4142-1
- 中国/上海
- 2025年07月16日
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AO/PI双染试剂盒 细胞凋亡检测
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1年
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上海联迈生物工程有限公司
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保存条件请参阅产品说明书
- 规格：
100T
AO/PI双染试剂盒 细胞凋亡检测
产品概述
-
储存条件：
2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：六个月。
产品简介：
双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。橙（Acridine Orange，AO）为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。Propidium Iodide是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为488nm和630nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。
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文献和实验增加，PI等核酸染料进入细胞与细胞核中的核酸结合，发出红色荧光。所以Annexin V-FITC(绿色荧光)常与鉴定细胞死活的核酸染料（如PI）合并使用，来区分凋亡细胞与死亡细胞。 此试剂盒可用于流式细胞仪和组织切片染色。 图1 Annexin V-FITC检测细胞凋亡的原理示意图 图2 凋亡细胞样品的Annexin V－FITC单染流式图 【关于流式图的说明：横坐标的数值表示荧光强度；纵坐标的数值表示细胞数；102 －103 之间高荧光强度的峰为凋亡细胞。】 图
凋亡的研究方法 一、定性和定量研究 只定性的研究方法：常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察（普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜） 进行定量或半定量的研究方法：各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。 二、区分凋亡和坏死 可将二者区分开的方法：琼脂糖凝胶电泳，形态学观察（透射电镜是是区分凋亡和坏死最可靠的方法），Hoechst33342/PI双染色法流式细胞仪检测，AnnexinV/PI双染色法流式细胞仪检测等。 不能将二者区分开的方法：原位末端
References [1] Danise P, Amendola G, Di CR, et al. Nucleated red blood cells and soluble transferrin receptor in thalassemia syndromes: relationship with global and ineffective erythropoiesis. Clin Chem Lab Med. 2009. 47(12): 1539-42. STABLE
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