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- 库存:
88
- 英文名:
M199 medium
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
500ml
特别提示:包括M199培养基(含Earle平衡盐,含L谷氨酰胺)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:M199培养基(含Earle平衡盐,含L谷氨酰胺)
英文名称:M199 medium
产品货号:SNM539
产品规格:500ml
除了M199培养基(含Earle平衡盐,含L谷氨酰胺),我公司还供应以下相关产品:
名称:YPDG液体培养基
货号:BTN130897
规格:250mL
YPDG培养基为YPD和YPG培养基的混合培养基。可用来区分+和-菌落。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
名称:自诱导培养基(lac启动子)
货号:BTN100825
规格:200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,zuì高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 成分A | 200ml |
| 成分B | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一、培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二、培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底zuì好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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文献和实验相关专题 在实验室中,M199培养基可分为粉状和液体两种形式,主要应用于细胞培养 。本文介绍M199培养基的组成成分、主要性状、配制和贮存方法、以及有效期限等,以利于大家对其正确有效地使用。 一.【组成成分】 无机盐:氯化钠、氯化钙、氯化钾、无水磷酸二氢钠、六水合氯化镁等。 氨基酸:L-盐酸精氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-谷氨酰胺、L-酪氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸等。 维生素:维生
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有: 1.Dulbecco,s平衡盐(D-PBS),不含碳酸氢钠; 2.Hanks,平衡盐(HBSS),含碳酸氢钠少,约0.35mg/L; 3.Earle,s平衡盐(EBSS),含碳酸氢钠多,约2.2mg/L; 4.PBS平衡盐,无Ca2+、Mg2+离子。 (二)细胞培养基 1.传统基础细胞培养基及其改良培养基 基础细胞培养基通常指基础合成培养基,主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质(核酸降解物、氧化还原剂等)。 据不同细胞和研究目的,选用合适培养基,还可补加新成分。如杂交瘤中
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