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165
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
1卷,5M
特别提示:包括20KD透析袋(φ16mm)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:20KD透析袋(φ16mm)
产品货号:HR8152
产品规格:1卷,5M
压平宽度:25mm
除了20KD透析袋(φ16mm),,我公司还供应以下相关产品:
名称:30% Acr-Bis (29:1)
货号:YT623
规格:100ml
本品为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。本品常用于配制*烯酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。是实验室的常用储备液。
储存条件:4℃避光。
名称:*硫酸铵(APS)
货号:YT625
规格:10g
本品用于配制PAGE胶等,通常先配制成10%的水溶液,然后再用于配制各种PAGE胶。10%*硫酸铵水溶液在室温状况下不太稳定,4℃可以保存3-5天,-20℃可以保存1-2个月。
分子式:(NH4)2S2O8
分子量:228.20
纯度:>98%
储存条件:室温。
名称:蛋白银染试剂盒
货号:WE0281
规格:20次
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事项:
1、请提前准备50ml固定液(超纯水:乙醇:冰*酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰*酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇,冰*酸。
操作步骤:
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量25ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
请提前准备好50ml固定液(超纯水:乙醇:冰*酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰*酸)。
1、水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2、固定:用25ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3、洗脱:用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4、水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5、增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中,混匀。
6、银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验图例
BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD,上样量从左到右分别为50ng,10ng,5ng
储存条件:室温。
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文献和实验(一) 原理 粒细胞系列的白血病细胞中形成的φ(Phi)小体与3,3,—二氨基联苯胺(DAB)及(或)过氧化氢基质液作用,以及硝酸酮处理的氢过氧化酶染色,能催化DAB氧化生成蓝色沉淀,定位于胞质中。 (二) 操作步骤 1 试剂配制 (1) 1.25%戊二醛固定液:0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PH7.3)95ml,分析纯戊二醛液(25%浓度)5ml,分析纯纯甲醛液(37%浓度)2ml,混匀并调整PH至7.3。 (2) 基质液: 3,3,—二氨基联苯胺5mg
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析
透析即用半透膜(透析袋)将大分子蛋白质分离出来。在生物大分子制备过程中除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品,透析法最简便。 技术指标:MWCO(截留分子量),单位:Diatoms 。 透析时,小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。常用温度:4℃
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