- ¥1690
- 钦诚生物
- QC-P-085
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
12个月
- 库存：
大量
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
50T
- 即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
- 荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
- 提供阳性对照，便于分析实验结果。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次塑料袋包装 |
| 2×qPCR Mix | 90408 | 1.0 mL |
| stn 专一性引物对 | yw13891390 | 200 μL |
| stn 阳性对照， XXX 10E9 拷贝/μL |
yw13911392 |
100 μL |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL |
| 使用手册 | 1 份 | |
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓
度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本 试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供 活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
- 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
- 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
- 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到
- 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
- 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
- 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
- NC 管中不加任何阳性对照。
- 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
- PCR 检测（20 μL 体系）
- 在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
- 建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 93℃ | 5 min |
| PCR 反应 （40 个循环） |
93℃ | 35 s |
| 55℃ | 45 s |
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合
DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再
以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验类天花病毒 smallpox virus，Variola virus
天花（天然痘）是在全身皮肤上产生特有的浓疱性泡疹，是死亡率很高的疾病，即使康复也遗有终生疤痕。病原体天花病毒属于痘病毒属，感染细胞内的小体是由J． B． Buist于 1886年发现的，并由 E． Pas－ chen进行了详细地观察，而称作帕氏小体。瓜尼里（ Guarnieri）小体，即指现在的 B型包涵体。此病毒也易感染猴，并出现与人相同的症状。牛的天花称为牛痘（ cowpox），其病原体牛痘病毒酷似痘苗病毒。人一经接种牛痘后对天花就能免疫，琴纳（ E． Jenner）就曾用此法进行
由天花病毒引起的烈性传染病。天花是最古老的传染病之一，也是死亡率最高的传染病之一，历史上曾在世界各地流行，给人类带来过极大的灾难。 18世纪，在欧洲就有 1.5亿以上的人口死于天花。天花病毒是一种和牛痘病毒在大小和形状上相似的病毒。电镜下为长方形，直径为 230～ 300毫微米，耐干热和低温。加热至 55℃半小时即可破坏。天花的唯一传染源是天花病人。传播途径主要通过飞沫、尘埃传播，也可通过生活用品间接传播。一次患病后，可获终生免疫力。接种痘苗后的免疫力可持续 4～ 5年。本病
人脑是动物界中最高度发达的大脑，也是我们身体中最复杂的器官。由于其独特的复杂性，很难用动物系统来模拟人脑的发育。然而，人脑类器官现在已经成功地用于模拟人脑发育和疾病发生。人脑类器官培养是一项令人兴奋的新技术，科学家们基于模拟内源性发育过程，通过将多能干细胞（PSCs）进行诱导分化及自组装后，在体外重现了人类大脑发育的进程。最近的研究表明，脑类器官可以模拟神经发生的时空动态、区域神经回路的形成以及胶质细胞整合成神经网络。这一技术可以帮助我们探索大脑发育、新陈代谢机制，并进行药物功效测试
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