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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
小鼠
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
常温运输
- 生长状态:
优
- 规格:
5×10⁵cells/T25培养瓶
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文献和实验养活了,至少我做成功的次数很少,浪费了我不少时间.SD的差不多每次都会成功的.2、我用的是胰酶,0.1%,大概4只乳鼠要消化10左右,每次4-5分钟,不能时间长,虽然时间长了,消化的快些,但是接种后很难存活,听说过加了胶原酶会好些,不过我没试过,主要是因为它太贵了,我们买不起.消化过和中会出现絮状物我的感觉是消化可能有些快了。我的处理是如果样品足够多就可以将之丢去,样品少的话,可以先将所有的样品吸入另一新的离心管,重新在这个管字消化.将细胞悬液用5%血清培养液中止消化,而且一定得尽快中止.离心后再中止一次
1、如果细胞状态不好,可能是消化或者培养基的原因,细胞胞浆会出现空泡,一旦出现过多,细胞基本不能用。2、心肌细胞不能传代。3、心肌细胞有聚集生长的特性,培养时间长点,一般超过4天后,细胞会聚集成小岛状,以小岛为中心搏动,当然有小岛说明细胞密度较小。4、心肌细胞的状态与细胞密度有很大关系,一般细胞密度越大,心肌细胞相对来说越容易长好,达到同步搏动的时间也快。5、心肌细胞同步搏动不难达到,基本上消化培养的过程合理一点,密度大一点,密度小的时候24小时换液时就能见到个别细胞搏动,密度
一周龄大鼠,断颈处死,活力碘消毒,无菌取出肝脏,于无菌维持液中漂洗,用眼科剪仔细清除肝包膜,韧带,沿肝边缘剪切肝尖组织(绕开肝蒂等)转入青霉素小瓶中,用眼科剪绞碎,剪成0.1-1.0mm3大小的碎片,加入5倍体积无菌维持液,用滴管轻轻吹打,吸出上层血细胞再用无菌维持液反复清洗3~5次,加入10倍体积无菌胰蛋白酶消化液,37℃消化,消化过程中不断震荡,至组织块边缘变薄(镜下观),离心(1000rpm,10分钟)弃去上面酶液,用无菌维持液将组织块清洗2~3次,加入新鲜无菌胰蛋白酶消化液重复上述步骤
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