快速Pfu DNA聚合酶

特别提示：包括快速Pfu DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：快速Pfu DNA聚合酶
英文名称：Fast Pfu DNA Polymerase
产品货号：JN0027
产品规格：250U

  Pfu DNA聚合酶为zuì常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（1kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的扩增缺陷， 百奥莱博采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。

产品组成：

组份	JN0027-250U
Fast Pfu DNA 聚合酶（5U/μl）	50μl
dNTP混合液（各10mM）	200μl
5×Fast Pfu Buffer with Mg2+	2ml

产品特点：
1、高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
2、快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
3、高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
4、高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段（图例一）。同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于普通Pfu酶。
5、独特配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成、DNA末端补平等。

使用建议：
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3′端"A"突出，除使用BalbRec 一步定向无缝克隆外，其它PCR产物的克隆方案有：
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
注意：由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′ 端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′→5′ 外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并zuì后加入Fast Pfu酶。

应用实例：

图例一） 50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（1.2kb）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA Ladder 2000

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入 反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系（50μl）

组分	体积
5×Fast Pfu Buffer*	10μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
Fast Pfu	0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

除了快速Pfu DNA聚合酶,，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
BTN60901	可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂	0.3mL
WE0159	dNTP混合溶液(10 mM)	1ml|5ml
ALH191	荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法)	50μl×25次|50μl×50次
RFT162	10mM dNTP溶液	0.5ml|5×0.5ml
RFT163	2.5mM dNTP溶液	0.5ml|5×0.5ml
SY0035	热启动PCR Master Mix(不含染料)	1ml×5
SY0291	第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR	200T
JN0022	大片段Bst DNA聚合酶	800U
JN0045	PCR优化试剂盒	80次
QN0943	通用反转录试剂盒(不含Taq酶)	50T|100T
HQF11	全血免抽提直接PCR试剂盒	100次/500次/1000次
GL1299	AMV/MMLV反应缓冲液(10×,pH8.3)	10ml
WH0069	Taq Plus DNA聚合酶	250U|500U
WH0082	超纯dNTPs混合液（10mM)	1ml|5×1ml
WH0110	荧光定量检测试剂盒（染料法)	125次|500次|5000次