酸洗玻璃珠，1500-2000um

重组毕赤酵母的表达

-100kDa蛋白。样品准备：需要准备Breaking 缓冲液(P60)及酸洗0.5mm玻璃珠。 细胞洗涤准备：(胞内或分泌表达)    1) 快速融化细胞沉淀，置于冰上。    2) 每1ml样品，加入100ul裂解缓冲液(细胞 上清)。    3) 加入等量的酸洗玻璃珠(0.5mm)，通过置换来估算相等体积。    4) 涡旋30s，冰上孵育30s，重复8次。    5) 4度最大转速离心10min，将上清转移至干净的微量离心

酵母基因组DNA简易高效提取方案

  1. 10ml菌液过夜培养至饱和（OD600值为2-3） 2. 离心沉降细胞（Sorvall中以2000rpm的速度），然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮，然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1：1苯酚：氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min 5. 加入200μl的 TE缓冲液，倒置混合6-10次。注意：从这步开始漩涡摇匀可能会剪切DNA 6. 在微型离心机中以13000rpm的速度离心样品5min

高效液相色谱（HPLC）柱子的清洗和再生

的处理 拆下不锈钢烧结过滤器后，检查柱床，常可见柱头塌陷，此时先剔掉无规则床层和带色填料，使柱床呈白色并完全水平，再使甲醇作糊状填料匀浆液，将填料匀浆液滴在柱上靠重力从匀浆液中排出甲醇液，重复数次，直到水平，完成了柱的再生。此时，如果柱头孔隙深度小于1cm，可以采用下述局部重装的办法，否则，柱应当完全重装或更换。 柱入口局部重装时采用的填料可以和原填料一样，也可以用玻璃珠。粒径大于20um的可用敲打充填法干装。如果粒径小于20um则要用合适的溶剂配成匀浆，匀浆逐次加入，每次加入前