非酶多糖清除剂（RNA专用）

PCR 抑制物的来源与一般作用机制

。DNA 的一级结构不稳定，会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶，如果核酸酶处理不干净，残留在纯化的核酸样本中，从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶，在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用，很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶

PCR 常见问题解决方案全解析

: (1) 引物 检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解（建议用新合成的引物进行尝试）；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物（如果之前用过该引物，可排除引物设计问题）。 (2) 模板 长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的 DNA 双链作为模板；模板 GC 含量过高会导致 DNA 的双链无法打开，此时加入 PCR Enhancer，可以有效降低解链温度；模板为粗品，有可能是 DNA 未释放出来（若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩

RT-PCR 原理与实验技术

。 3. 始终注意避免 RNA 酶的污染。 4. 保管好自己专用的试剂，公用试剂保管好，相互协调，注意实验室卫生。