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病毒载体构建/慢病毒包装

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  • 北京
  • 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,属于逆转录病毒科,慢病毒属
  • 2025年07月16日
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      病毒载体构建/慢病毒包装

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      北京百奥创新科技有限公司

    技术简介:慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体,属于逆转录病毒科,慢病毒属,基因结构复杂,共包含9个基因,其中有3个和单纯逆转录病毒相似结构的基因:gag、pol、env;4个辅助基因:vif、vpr、nef、vpu和2个调节基因:tat和rev。该病毒能够将靶基因导入到一些较难转染的细胞,如原代细胞等,并且将靶基因随机整合到宿主的基因组中,可作为一种体外运输工具,从而大大增加了转染率,同时具有感染分裂期和非分裂期细胞、容纳外源性基因片段,可以稳定表达,持续时间长等显著优点。非常适用于基因过表达稳定细胞株的建立和RNA研究。
    慢病毒包装系统:一般由慢病毒表达和慢病毒包装载体组成,慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。
    构建原理:是将HIV2基因组中的顺式作用元件(包装信号和、长末端重复序列)和编码反式作用蛋白的序列进行分离。
    病毒包装技术应用:应用于稳转细胞株的筛选 为活体动物模型试验提供高质量的包含目的基因的病毒液,对于一些难转染的细胞,大大提高目的基因的转导效率。
    客户提供资料:客户与我司沟通商讨的试验方案、靶基因信息、模板或测序报告, 是否自行构建病毒载体,若需要本贵公司提供载体,需要额外收取费用 质量控制 测序鉴定 根据特定引物作RT-PCR鉴定 蛋白表达鉴定(根据客户需求,客户提供单克隆抗体) 实验周期 20~30个工作日
    我们的优势 1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。 2、专业的操作人员。 3、高规格实验室。 4、数据结果交付周期快。 5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。 服务流程 1、提交项目课题相关需求和资料。 2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。 3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。 5、开展实验,按期完成合同规定的内容。 6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
    咨询与订购:感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 客服电话:13132539152 网站:http://www.mogenetics.com 邮箱:market@mogenetics.com QQ:184194701

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      。 2.慢病毒包装与纯化 慢病毒包装采用三质粒或四质粒系统进行包装,收集细胞培养上清,通过超速离心浓缩纯化和收集病毒。 3.病毒滴度检测 检测方法:定量PCR检测干扰后细胞基因组中外源DNA拷贝数 实验原理:慢病毒介导外源基因以逆转录方式整合进目的细胞基因组 4.慢病毒载体优势 ①  表达时间长:慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上,实现基因长时间稳定的表达,不随细胞分裂传代而丢失,是细胞实验的首选,常用于构建稳转株 ② 安全性高:未发现致病性,慢病毒载体改造T细胞用于CAR-T

    • 慢病毒包装实验流程

      毒: 慢病毒 包装实验流程如下: 1.根据目的基因相关信息(序列,基因序列号等)获取目的基因; 2.根据客户要求选择对应载体 ; 3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体; 4. 测序鉴定重组质粒,高纯化(不含内毒素)提取的重组质粒; 5. 使用高纯提重组载体和慢病毒包装质粒共转染293FT 细胞,进行病毒包装并收集上清液; 6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒; 7. 使用病毒液感染293

    • CRISPR/Cas9 gRNA文库筛选功能基因

      分为五步,即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制(小于300个基因),我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计,保证每个基因设计3个不同的gRNA,最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体,单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因,双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA,cas9蛋白则由单独

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