- ¥1290
- 钦诚生物
- QC-120503
- 上海
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
一年
- 供应商：
钦诚生物
- 保存条件：
4°保存
- 规格：
50次
本产品专门针对藻类 RNA 提取开发的高效 RNA 提取试剂。该产品特点如下：
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| 成 份 | 编 号 | 大纸盒包装 | |||
| 柱式藻类 RNA 提取溶液 A | 71203a | 50 mL | |||
| 柱式藻类 RNA 提取溶液 B | 71203b | 15 mL | |||
| 柱式藻类 RNA 提取溶液 C | 71203c | 50 mL | |||
| 离心吸附柱 | 60911 | 50 套 | |||
| 通用洗柱液 | 60408 | 50 mL | |||
| RNA 洗脱液 | 71207 | 10 mL | |||
| 使用手册 | 71203sc | 1 份 | |||
| 注：溶液 B 为淡黄色液体，使用前请观察颜色是否正常。若溶液 B 有油粒状颗 粒及分层，属正常现象，不影响使用。 |
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| 常温运输和保存，溶液 B 需要 4℃保存，有效期一年。 | |||||
| 使用方法 |
用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
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- 室温 12000-15000 g 离心 3-5 分钟，两相间将有细胞破碎物。
- 将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中，下层有机相和中间层含有 DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100 uL 上清液不取。
- 加入等体积的柱式藻类 RNA 提取溶液 C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生（对某些含糖量高的藻类，属于正常现象），千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
- 先将一半的溶液（如果有沉淀，则将一半的悬浊液）转移到离心吸附柱中， 13000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。
- 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中， 13000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。
- 加 0.7 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加 0.3 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第 7 步加入柱式藻类 RNA 提取溶液 C 后有沉淀产生，则需要洗三次， 每次加入的通用洗涤液的量分别为 0.4、0.3 和 0.3 mL。
- 室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。
- 将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中，加入 50-100 uL RNA 洗脱液，室温放置 1-2 分钟。
- 13000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
- RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子
样品相关）建议使用含有 RNase-free DNase 处理步骤的柱式藻类RNAout
- RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出RNA 浓度（1 OD260 的RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
- RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。
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柱式藻类RNAout
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