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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
| 货号 | 名称 | 产品形式 | 规格 | 储存 |
| QC1492 | Origami 2 (DE3) Strain | 5ug | -20℃ |
使用说明:
收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其它产品相关性质及详情可咨询
QQ:597467067 电话18121034793。
基因型:
Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F′[lac+ lacIq pro] (DE3) gor522::Tn10trxB (StrR, TetR)
基本信息:
抗性:Str/Tet
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
备注:
菌株简介:
Origami 2系列菌株是K-12菌株衍生而来,在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。与Origami系列菌株相比,Origami 2系列菌株是卡那敏感的,这使得该菌株能够适用于大多数的蛋白表达质粒。Gor基因突变使得该菌株和原来的Origami(DE3)菌株一样具有四环素抗性。DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
Origami 2 (DE3)同时还是亮氨酸生长缺陷型宿主菌,可用于相关的克隆以及蛋白表达。
Origami 2 (DE3)可使用LB培养基在37℃有氧的条件下培养,然后用30%甘油-80℃保藏菌种,42℃热激可将质粒转入该菌株,此菌株在IPTG的诱导下可进行蛋白表达。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验(see table). Expression vector appropriate host strain pBAD vectors Top10, LMG194 pET vectors BL21 (DE3) pGEX vectors BL21 pMal vectors BL21, TB1 pProEx vectors BL21, DH10B pQE vectors M15 or M15 [pREP4] pRSET vectors BL21 (DE3) pLysS
错误。我们实验室合成引物都要先发给purchasing office,然后才由他们与公司交涉。这个office的老太太把引物弄掉了一个碱基。 教训:在实验过程中,再仔细都是不为过的。 引物来了后管壁上贴有序列,但我忽略了。 3. 第二次失败。后来重新构建,转化,诱导。第一次诱导时根本就没带。 然后开始找闷头原因。周一下午5点我就接了DE3菌,由于那天人非常不舒服,去看医生了,等了很久,到第二天中午11点才转接!而且是按1:50转接的!也就是菌在转接之前培养了18
是引物错误。我们实验室合成引物都要先发给purchasing office,然后才由他们与公司交涉。这个office的老太太把引物弄掉了一个碱基。教训:在实验过程中,再仔细都是不为过的。引物来了后管壁上贴有序列,但我忽略了。3. 第二次失败。后来重新构建,转化,诱导。第一次诱导时根本就没带。见附图(图片质量太差了,sorry,下面几个帖会逐渐好转。我们都在失败中提高,进步,不是吗)。然后开始找闷头原因。周一下午5点我就接了DE3菌,由于那天人非常不舒服,去看医生了,等了很久,到第二天中午11点
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