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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
| 货号 | 名称 | 产品形式 | 规格 | 储存 |
| QC1439 | JM109 Strain | 5ug | -20℃ |
使用说明:
收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其它产品相关性质及详情可咨询
QQ:597467067 电话18121034793。
基因型:
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI qZΔM15]
基本信息:
抗性:无
培养基:LB
菌株类别:大肠杆菌克隆菌
培养条件:37℃,有氧,LB
质粒转化:42℃热激
保存方式:20%甘油,-20℃
基本应用:用于基因克隆
备注:
菌株简介:
JM109菌株来源于E.coli K strain,是提取高质量DNA的理想菌株,JM109菌株是一个用于pGEM®载体转化和从M13或噬菌体载体中生产单链DNA的良好的宿主。JM109是recA-和缺乏大肠杆菌K限制系统,recA1 和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。携带 hsdR17基因型背景,使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解。laqI qZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用本产品的甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
性不利,容易出现质粒丢失、表达水平不稳定、菌株退化乃至发生污染等情况。 我们建议: 1、长期存放菌株和pET重组子应该存在甘油-70℃保种。但是要注意高浓度甘油(>10%)会导致质粒不稳定。请尽量保持甘油浓度8%。(15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行)2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株(带DE3的大肠杆菌)中,请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株(比如C600,DH5a)进行质粒抽提和保存质粒。表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题。特别是大量抽提。
, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
能力的质粒,由这种质粒转化的大肠杆菌形成白色菌落。 抗生素平板选择标记: ppUC19质粒带有氨苄青霉素抗性基因,而JM109宿主菌对氨苄青霉素没有抗性。在用pUC19质粒转化JM109后,涂布到含有氨苄青霉素的培养基上培养,没有被转化的菌不能生长,而被转化了的菌可以正常生长,形成菌落。 β-半乳糖苷酶系统筛选(蓝、白斑筛选): pUC19质粒带有一个大肠杆菌DNA的短区段, 其中含有β-半乳糖苷酶基因(Lac Z)的调控序列和头
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