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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
基本信息
| 启动子: | 需要克隆进入 |
|---|---|
| 复制子: | colE1 ori |
| 终止子: | rrnB T1,rrnB T2 |
| 质粒分类: | 乳杆菌表达质粒 |
| 质粒大小: | 7975bp |
| 质粒标签: | LacZ |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Ampicillin |
| 筛选标记: | 氯霉素chloramphenicol |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | 乳杆菌 |
质粒简介
pIAβ8是一个乳杆菌表达质粒
质粒图谱
质粒序列
M13R测序序列:
1 gtggcttgct gcctgcaggt cgactctaga ggaccccggg taccgagctc gaattcactg
61 gccgtcgttt tacaacgtcg tgactgggaa aaccctggcg ttacccaact taatcgcctt
121 gcagcacatc cccctttcgc cagctggcgt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgccct
181 tcccaacagt tgcgcagcct gaatggcgaa tgccgggaat tattcaccac tccaagaatt
241 ggagccaatc aattcttgcg gagaactgtg aatgcgcaaa ccaacccttg gcagaacata
301 tccatcgcgt ccgccatctc cagcagccgc acgcggcgca tctcggctgt tttggcggat
361 gagagaagat tttcagcctg atacagatta aatcagaacg cagaagcggt ctgataaaac
421 agaatttgcc tggcggcagt agcgcggtgg tcccacctga ccccatgccg aactcagaag
481 tgaaacgccg tagcgccgat ggtagtgtgg ggtctcccca tgcgagagta gggaactgcc
541 aggcatcaaa taaaacgaaa ggctcagtcg aaagactggg cctttcgttt tatctgttgt
601 ttgtcggtga acgctctcct gagtaggaca aatccgccgg gagcggattt gaacgttgcg
661 aagcaacggc ccggagggtg gcgggcagga cgcccgccat aaactgccag gcatcaaatt
721 aagcagaagg ccatcctgac ggatggcctt tttgcgtttc tacaaactct tcctgtcgtc
781 atatctacaa gccatccccc cacagatacg gtaaactagc ctcgtttttg catcaggaaa
841 gcagctgttt tggcggatga gagaagattt tcagcctgat acagattaaa tcagaacgca
901 gaagcggtct gataaaacag aatttgcctg gcggcagtaa cgcggtggtc ccacctgacc
961 ccatgccgaa ctcagaagtg aaacgccgta gcgccgatgg taatgtgggg tctccccatg
1021 ccaaaatagg aaactgccag gcttcaaatt aaacgaaagg gtcagtcgaa aaaactgggc
1081 ctttcggttt atctt
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文献和实验染色体长55kb,在细胞内很稳定,只是每个细胞里的拷贝数很少。比如已构成的人工微小染色体为7~15kb,每个细胞里的拷贝数虽然增多,但不够稳定。 人工构建酵母微小染色体的具体步骤见图23-6。从图中可以看到,先用质粒pBR322为材料,连接酵母的标记基因Leu2(亮氨酸)后去转化大肠杆菌,然后再接上酵母染色体上分离得到的着丝粒CEN3,再去转化大肠杆菌以增殖重组质粒,取得下一步实验用的DNA。接下去是连接从酵母(真核生物)中分离得到的ARS1。ARS是指自主复制顺序
,例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等,常用的载体一般为质粒;根据需要可直接从公司购买合适的载体,也可以自己构建。(3)连接:目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体,使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同,产生三种连接方式:粘端连接、平端连接和不相配的连接。(4)转化:将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞,使其在宿主细胞内复制扩增或表达,赋予宿主细胞新的生物特征。(5)克隆化:重组 DNA 分子转化大肠杆菌后,在平板
又是代谢的锅,不治之症银屑病终于有盼头了!上交王宏林教授团队Immunity重磅报道
PP6 的正常人表皮细胞中,C/EBP-β 信号激活 (图 E 和 F)。作者还发现 PP6 与 C/EBP-β 在细胞核内有直接或间接相互作用。图片来源:Immunity 而且,在 PP6-/-293FT 细胞系中,Thr-179、Ser-184 和 Thr-188 过度磷酸化。通过构建表达质粒,作者发现 PP6 与 WT C/EBP-β 在细胞核内相互作用。PP6-C/EBP-βS184A 和 PP6-C/EBP-βT188A 的相互作用以及具有 Ser-184 和 Thr-188 双突变
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