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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
基本信息
| 启动子: | CaMV 35S |
|---|---|
| 终止子: | NOS |
| 质粒分类: | 植物系列,RNAi载体 |
| 质粒大小: | 12880bp |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | Neo |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧 LB |
| 表达宿主: | 植物细胞 |
| 5'测序引物: | 35S:GACGCACAATCCCACTATCC |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒简介
siRNA) caused by RNA (interference RNA short)Interference (RNAi) is a very effective test method. It is a creature The body of a molecule by double stranded RNA (dsRNA) molecules to make specific Degradation of the sequence of mRNA resulted in the silencing of gene expression. This phenomenon occurs at the post transcriptional level, that is, sequence specific Post transcriptional gene silencing
质粒图谱
pROKII-RNAI植物干扰质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pROKII-RNAI植物干扰质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验RNA沉默是广泛存在于生物中的一种古老现象,是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,同时在生物生长发育过程中扮演着基因表达调控的角色。文章对RNA沉默研究中的几个热点问题进行了介绍,按RNA沉默持续时间的不同对其在植物中应用的方法进行了分析,并重点论述了RNA沉默在植物功能基因组研究、作物品质改良以及抗病毒植物培育等方面的应用及其发展前景。RNA沉默(RNAsilencing)是一种结合和降解特异mRNA序列的形式,其发现可追溯到1990年,Napoli等]向矮牵牛中导入更多拷贝与粉红色色素合成
RNAi即RNA干涉(或RNA干扰)是指双链RNA导入细胞后并被切割成21~23个核苷酸长度的短核苷酸双链,在其它作用因子的参与下能够特异地与其同源的mRNA结合并导致其降解,从而使得内源基因不能表达,导致内源基因的沉默。自1998年Fire等首次在线虫中发现并阐明以来,RNAi已经在其它动物、植物和真菌中被证实。研究表明参与该过程的许多基因具有高度的保守性,这可能是 生物 调控基因表达及抵御病毒侵染或转座子诱导DNA突变的一种
摘要 RNAi技术是研究基因功能的重要工具。其原理是对某个已知基因,设计诱导其沉默的dsRNA,通过合适手段导入细胞或机体使产生干涉效应的信号分子siRNA,导致基因表达水平下降或完全沉默。通过基因表型变化,鉴定该基因功能。从RNAi的研究背景和作用机制出发,对近年来利用RNAi技术研究植物基因功能的概况、诱导方法和载体作一综述。关键词 基因沉默;RNAi技术;植物基因功能 1 RANi的研究背景 1998年,Fire等[1]发现,过去利用正反
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