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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
2UG/5UG
| 规格: | 2UG | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5UG | 产品价格: | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | NM_145803.2,MGC:3310; RNF85 |
|---|---|
| 质粒分类: | 基因文库质粒 |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | 大肠杆菌DH5α |
| 培养条件: | 37℃ |
质粒简介
Homo sapiens TNF receptor associated factor 6 (TRAF6), transcript variant 1, mRNA
质粒图谱
质粒序列
Homo sapiens TNF receptor associated factor 6 (TRAF6), transcript variant 1, mRNA
NCBI Reference Sequence: NM_145803.2
atgagtctg ctaaactgtg aaaacagctg tggatccagc
421 cagtctgaaa gtgactgctg tgtggccatg gccagctcct gtagcgctgt aacaaaagat
481 gatagtgtgg gtggaactgc cagcacgggg aacctctcca gctcatttat ggaggagatc
541 cagggatatg atgtagagtt tgacccaccc ctggaaagca agtatgaatg ccccatctgc
601 ttgatggcat tacgagaagc agtgcaaacg ccatgcggcc ataggttctg caaagcctgc
661 atcataaaat caataaggga tgcaggtcac aaatgtccag ttgacaatga aatactgctg
721 gaaaatcaac tatttccaga caattttgca aaacgtgaga ttctttctct gatggtgaaa
781 tgtccaaatg aaggttgttt gcacaagatg gaactgagac atcttgagga tcatcaagca
841 cattgtgagt ttgctcttat ggattgtccc caatgccagc gtcccttcca aaaattccat
901 attaatattc acattctgaa ggattgtcca aggagacagg tttcttgtga caactgtgct
961 gcatcaatgg catttgaaga taaagagatc catgaccaga actgtccttt ggcaaatgtc
1021 atctgtgaat actgcaatac tatactcatc agagaacaga tgcctaatca ttatgatcta
1081 gactgcccta cagccccaat tccatgcaca ttcagtactt ttggttgcca tgaaaagatg
1141 cagaggaatc acttggcacg ccacctacaa gagaacaccc agtcacacat gagaatgttg
1201 gcccaggctg ttcatagttt gagcgttata cccgactctg ggtatatctc agaggtccgg
1261 aatttccagg aaactattca ccagttagag ggtcgccttg taagacaaga ccatcaaatc
1321 cgggagctga ctgctaaaat ggaaactcag agtatgtatg taagtgagct caaacgaacc
1381 attcgaaccc ttgaggacaa agttgctgaa atcgaagcac agcagtgcaa tggaatttat
1441 atttggaaga ttggcaactt tggaatgcat ttgaaatgtc aagaagagga gaaacctgtt
1501 gtgattcata gccctggatt ctacactggc aaacccgggt acaaactgtg catgcgcttg
1561 caccttcagt taccgactgc tcagcgctgt gcaaactata tatccctttt tgtccacaca
1621 atgcaaggag aatatgacag ccacctccct tggcccttcc agggtacaat acgccttaca
1681 attcttgatc agtctgaagc acctgtaagg caaaaccacg aagagataat ggatgccaaa
1741 ccagagctgc ttgctttcca gcgacccaca atcccacgga acccaaaagg ttttggctat
1801 gtaactttta tgcatctgga agccctaaga caaagaactt tcattaagga tgacacatta
1861 ttagtgcgct gtgaggtctc cacccgcttt gacatgggta gccttcggag ggagggtttt
1921 cagccacgaa gtactgatgc aggggtatag
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文献和实验浓度不同,两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中,主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后,高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA,单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板(1ng/μL)(质粒 R-pGEX-4T-1,R 指代外源基因) 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2(5pmol/μL) 引物
设计了 sgRNA 之后怎么办呢?还是这篇文章先讲一下这里的框架首先是实验设计Experimental design1. Target selection for sgRNA--选择靶点详情见:CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计 https://www.jianshu.com/p/ 8222f449cb442. Approaches for sgRNA construction and delivery.sgRNA 的合成和投递有两种方式:A)PCR;B)单独的 sgRNA
基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端
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