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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
603
- 英文名:
LB1 Broth
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
10个/盒
特别提示:包括含225ml LB1肉汤均质袋在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:含225ml LB1肉汤均质袋
英文名称:LB1 Broth
产品规格:10个/盒
用途:用于李斯特氏菌制样和前增菌培养(GB标准)
添加剂:每盒需配套添加2包*啶酮酸5.0mg和2包吖啶黄素3.0mg使用。
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文献和实验pUC18 DNA,并取1 ml稀释的pUC18 DNA加入转化细胞。6、 温和转动试管,并在冰上放置30分钟。7、 试管在42°C水浴热激30秒。热激时间对转化效率极度重要。8、 试管冰浴2 分钟。9、 每管加入0.9 ml 预热 (42°C) 的NZY+ 肉汤,37°C、225–250 rpm 摇床培养1 小时。.10、 取200 ml转化混和物铺带有相应筛选抗生素的LB琼脂糖平板(如果进行颜色筛选还需加入IPTG和X-gal)。pUC18阳性对照则取5 ml 铺氨苄青霉素LB琼脂糖平板。注意
感受态细胞的制备: 1, 把DH5菌种分别接种在含氨卞的LB平板和不含氨卞的LB平板上,培养16-18小时。结果在不含氨卞的LB平板上DH5菌长出单个菌落,而在含氨卞的LB平板上无可见菌落生成,证明DH5菌未被杂菌污染; 2, 挑取单个菌落接种于2ml不含氨卞的LB肉汤,37度,150rpm,,振荡培养过夜; 3, 取上述0.2ml菌液接种于30ml不含氨卞的LB肉汤,37度,150rpm,,振荡培养3小时,使其OD600=0.4; 4, 将上述培养物转入40ml离心管,冰浴10
沉淀加入750μl预冷的(4℃)75mmol/L CaCL2 溶液,轻轻吹打菌悬液,放冰浴30min。 5.4℃3000rpm/min,离心5min,弃上清。 6.菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCL2溶液,冰浴4min以上。4℃保存备用。 (二)质粒转化 【材料】 1.pBR322 质粒DNA, 2.感受态菌75mmol CaCl2 3.LB肉汤培养基,无药LB琼脂平板,氨苄青霉素琼脂平板(50ug/ml) 4.
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