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- 详细信息
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- 库存:
135
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
1ml
特别提示:包括胰蛋白酶抑制剂混合物在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:胰蛋白酶抑制剂混合物
产品货号:HR0302
产品规格:1ml
胰蛋白酶抑制剂采用进口高品质原料配制。浓度为10mg/ml。活性7,000 BAEEunits/mg。胰蛋白酶抑制剂属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族,来源于大豆,能有效抑制胰蛋白酶的蛋白水解作用。
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
根据需要加入组织细胞裂解液或细胞消化液等液体中,混匀即可。
有效使用浓度一般为1mg 抑制剂用于1-3mg 目的蛋白。一般用PBS 稀释至0.25-0.5mg/ml,加入抑制等体积的胰酶。
除了胰蛋白酶抑制剂混合物,,我公司还供应以下相关产品:
名称:定影粉
货号:WE0302
规格:20套
名称:快速SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
货号:SNM454
规格:30-50T
名称:彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2~45kD)
货号:RFT043
规格:10T(50μl)
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为1.2kD-45kD,分子量大小为 1.2kD,4.6kD,10kD,16kD,27kD,45kD (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。
储存条件:-20℃。
名称:大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)
货号:SY0369
规格:100U
重组肠激酶(rEK)是高纯度的牛肠激酶轻链亚基,它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性,切割位点AspAspAspAspLys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,本rEK具有比天然酶更高的切割活性。
本品为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,适用范围广,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,故后续不需将其去除。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
来源:E. Coli
分子量:25.850 kDa
外观:无菌液体
酶浓度):10000U/ml,相当于10U/ul
活性定义:一个活性单位定义为25 ℃,12~16h,在25mM Tris-HCl,pH8.缓冲体系下,将500μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量。
内毒素检测:用LAL法测定内毒素含量小于1EU/μg
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。
常见影响肠激酶活性的因素:>2M 尿素,>200mM NaCl,>20mM β-ME,>0.1% SDS,>50mM 咪唑,或>5% 甘油
【注】:如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释,使得各组分低于干扰浓度后再酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。
1)反应体系(1000μl)
融合蛋白———0.5-1mg(蛋白浓度:0.1-1mg/ml)
Enterokinase——————————————1-2U
10×rEK Reaction Buffer————————100μl
补DDW(超纯水)——————————To 1000μl
2)反应条件: 25 ℃过夜酶切(注:完全酶切需要16-24h)。
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同,建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
【注】重组肠激酶可使用25mM Tris-Hcl pH8.0稀释成每1μl含0.1单位的溶液使用。
特别注意事项
1)磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
2)本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。
3)蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。
4)本品仅作科研用途!为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验问:大豆胰蛋白酶抑制剂sigma有type-1和type-2两种,请问他们是怎么分类的,和kunitz,bowman-birk有什么关系?他们对胰蛋白酶,凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶抑制的特异性如何?答:根据蛋白酶抑制剂所作用于蛋白酶的类型,大致可以将其分为四大类:丝氨酸蛋白酶抑制剂、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、天冬酰胺蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。丝氨酸蛋白酶抑制剂是研究较多的一大类,其中就包括您提到的Kunitz和Bowman-birk这两个比较重要的抑制剂家族。一般来说Kunitz型抑制剂分子
胰蛋白酶抑制剂 trypsin inhibitor 由生物产生,为与胰蛋白酶结合具有抑制该酶作用的物质。最初在胰脏中发现,但多数发现于血浆、豆科植物的种子、鸟类的卵等。认为动物的胰蛋白酶抑制剂的作用是调节胰蛋白酶的活性,但植物中的这种物质,其存在的意义还不清楚。它和胰蛋白酶形成 1∶ 1复合体,覆盖着活性部位起抑制作用。一般其结合力相当强,特异性也高,但有的对胰糜蛋白酶等其它蛋白酶也起抑制作用。上述列举的是低分子蛋白质,但最近从放线菌中发现一种新类型的物质,称为白肽
亲和层析制备胰蛋白酶抑制剂 [原理] 鸡卵类粘蛋白是一种专一性很强的胰蛋白酶的抑制剂,对猪和牛的胰蛋白酶有很强的抑制作用(而对胰凝乳蛋白酶无抑制作用)。 双功能 试剂 β-硫酸脂乙砜基苯胺(SESA)活化珠状交联琼脂糖,重氮化后与胰蛋白酶偶联形成亲和吸附剂,来制备卵粘蛋白。 [方法和步骤] 1、亲和吸附剂——固定
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