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- 百奥莱博
- GL1464-OJS
- 北京
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
321
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温
- 规格：
500ml
特别提示：包括包涵体裂解缓冲液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：包涵体裂解缓冲液
产品货号：GL1464
产品规格：500ml
用途：
蛋白质分离，溶解包涵体
注意事项：
主要由PBS(pH7.1)、氯化钠、EDTA组成。
储存条件：室温，12个月
除了包涵体裂解缓冲液,，我公司还供应以下相关产品：
名称：His标签蛋白纯化试剂盒
货号：YT046
规格：10ml
本试剂盒是一种采用了新型His-tag蛋白纯化树脂(YT616)的可以兼容还原剂和螯合剂，并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的试剂盒。试剂盒提供了His标签蛋白所需的相关试剂和亲和层析空柱管，为His标签蛋白的纯化带来了极大的便利。
一个包装的本产品zuì多可纯化10种带有His标签重组蛋白，每种蛋白的zuì大纯化量为10-15mg。对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白，一个包装的本产品实际zuì多可纯化10种约3-10mg的蛋白。在不使用亲和层析空柱管的情况下，参考本说明书本试剂盒足够进行500次的小量His标签蛋白纯化。
His-tag蛋白纯化树脂————10ml
非变性裂解液————120ml
非变性洗涤液————60ml
非变性洗脱液————60ml
溶菌酶———————60mg
亲和层析空柱管(3毫升)————10套
注意事项：
1. 请勿在-20℃或更低温度冷冻保存His-tag蛋白纯化树脂。
2. His-tag蛋白纯化树脂使用过程中，缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM，EDTA浓度不宜超过20mM，SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%，Triton、Tween、NP-40的浓度不宜超过2%，脱氧胆酸钠、CHAPS的浓度不宜超过1%，组氨酸浓度不宜超过20mM，钙离子浓度不宜超过5mM，钠离子和镁离子浓度可以高达2M，甘油浓度可以高达50%。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂，但还有待实验验证。
3. His-tag蛋白纯化树脂保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
4. 若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物，可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
5. 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4℃或冰浴，以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解，可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物。
6. 若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果，可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH，以达到zuì优效果。
储存条件：4℃，有效期一年。
名称：RIPA裂解液(中)
货号：SY0316
规格：100ml
本品属于裂解强度居中的RIPA裂解液，含有sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
(一) 细胞样品
1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。
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文献和实验. ( 3 ) l× 凝胶电泳 加样缓冲液： 50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 ) 50 mmol / L DTT 2 % SDS (电泳级) 0.1 % 溴酚蓝 10 % 甘油 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化 材料： 1 )酶溶法 (1)裂解缓冲液： 50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol
条带说明，从左到右，或1234567..... 2、建议把流程中的各个部分所用缓冲液说明一下，例如： 破菌缓冲液:如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl 破菌方法：如超声，4s工作，4s间隙，冰水浴，共200次 包涵体洗涤液：如PBS（pH7.4，20mM PB，0.15N NaCl） 包涵体溶解液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素 柱平衡液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素，20mM 咪唑 柱淋洗液：如pH
改进，提出了包括折叠漏斗和聚集漏斗的双折叠漏斗模型（Clark,2004）。基于该模型可知在大多数蛋白质的折叠过程中，与正确折叠相竞争的还有错误折叠和聚集沉淀，聚集态蛋白质具有与天然态相似的低自由能，处于聚集漏斗的底部，一旦形成将难以恢复天然活性态。 包涵体蛋白的复性 包涵体蛋白的复性步骤主要包括裂解、洗涤、溶解、复性。 裂解 大肠杆菌经发酵后，表达的外源蛋白多以稳定的包涵体形式存在于细胞质中，将其提取出来方法多采用超声破碎法，而由于超声处理量的限制，生产工艺一般采用高压均浆破碎，破碎后大肠
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